[发明专利]一种放射性核素标记的特异性前哨淋巴结显像剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物制药领域，具体地，涉及一种放射性核素标记的特异性前哨淋巴结显像剂及其制备方法。

背景技术

手术是治疗乳腺癌的主要手段，由于腋窝淋巴结状态是影响乳腺癌病人生存的重要的独立性预后因子，临床上常用腋窝淋巴结清扫作为腋窝淋巴结状态诊断和治疗的一种手段，而单纯乳腺切除加腋窝淋巴结清扫(axillary lymph node dissection,ALND)是最常用的手术方式。随着乳腺癌的筛查和早期诊断，新发现的乳腺癌患者中50％～70％术后病理腋淋巴结阴性，对该部分患者施行ALND属于过度治疗；因此对所有乳腺癌患者均进行ALND的合理性受到质疑，迫切期待能够替代ALND的准确、微创的腋窝分期技术—乳腺癌前哨淋巴结活检(sentinel lymph node biopsy，SLNB)。SLN是乳腺癌淋巴转移的第一个淋巴结，可获得95％的诊断意义，并发症少。

SLNB由于能够提供较为准确的分期、减少传统手术并发症而成为研究的热点之一,也是有望成为乳腺癌治疗的规范化手术式之一。在众多研究中,选取的放射性示踪剂几乎都是依靠淋巴结吞噬作用进行探测的放射性胶体(^99mTc-硫胶体或^99mTc-人血清白蛋白等)，其颗粒大小不均,次级淋巴系统有显影,每次注入示踪剂颗粒总数不易控制,且显像及活检时间要求高，否则均可导致非SLN显影，导致SLNB失败。2013年3月美国药监局首次批准用于淋巴结定位的新药Lymphoseek。它能够与淋巴网状内皮细胞表面甘露糖受体(mannose receptor，CD206)特异性结合，精确检测原发肿瘤(乳腺癌、黑色素瘤)向淋巴转移情况。面对国外公司专利、技术保护的前提下，亟需发展新型特异性的淋巴结定位显像剂，以应对国内临床需求。

申请人前期通过2-氨基噻吩的方法，制备出^99mTc-IT-Rituximab，并进行了该单抗在乳腺癌前哨淋巴结显像中的临床应用研究，研究内容见参考文献(李囡，林保和，欧阳涛，等.^99mTc-美罗华进行原发性乳腺癌前哨淋巴结活检。中华医学影像技术，2009，25(4):681-684.李囡，林保和，欧阳涛，等.467例乳腺癌患者^99mTc-美罗华前哨淋巴结显像及活检结果分析。中华核医学杂志，2009，29(1):3-7)，该探针只能现制现用，不适合保存。申请人通过进一步研究，制备出相应的药盒(李艳，李囡，杨志等.特异性前哨淋巴结显像剂^99mTc-rituximab药盒的制备及生物评价。同位素，2011，S1(24):85-89)。但这种药盒的稳定性相对较差，且在药盒中没有惰性气体的保护。在常温条件下保存时间不超过3天，在-20度条件下的保留时间一般不能超过三个月。

发明内容

本发明的目的在于提供一种使用方便、性能稳定、可操作性强的放射性核素标记的特异性前哨淋巴结显像剂。

本发明的再一个目的在于提供一种稳定性好的特异性前哨淋巴结显像药物的制备及药盒化的方法。

本发明首先提供一种特异性前哨淋巴结显像剂前体，是以双功能螯合剂HYNIC或2-IT或巯基乙醇为偶联基团对美罗华单抗进行化学修饰，获得可用于放射性标记的SLN-F单抗前体。

优选地，本发明提供的特异性前哨淋巴结显像剂前体是以双功能螯合剂HYNIC为偶联基团对美罗华单抗进行化学修饰获得的。

具体地，本发明提供的特异性前哨淋巴结显像剂前体通过以下方法制备得到：按照美罗华单抗与HYNIC双功能螯合剂或2-IT或巯基乙醇物质的量比1：2～50混合，在4～25℃条件下，避光反应15～40min；反应完成后以PD-10柱分离、纯化、收集。

优选地，美罗华单抗与HYNIC双功能螯合剂摩尔比1：3混合，在4℃条件下，避光反应30min。

本发明提供了含有上述特异性前哨淋巴结显像剂前体的药盒。

具体地，该药盒通过以下方法制备得到：

(1)在无菌条件下，按照显像剂前体与赋形剂的质量比1:10～40向其中加入赋形剂，于1-100Pa，-100～-50℃条件下冷冻干燥10～30h；

(2)充入惰性气体至标准大气压；

(3)无菌条件下，≤-20℃包装即得SLN-F药盒。

所述赋形剂为尿素、蔗糖、果糖、甘露糖、葡萄糖中的一种或者多种；所述惰性气体为氦气、氩气、氪气或氮气。还可以加入稳定剂，所述稳定剂为人血白蛋白、维生素C、IgG。