[发明专利]一种重组糖苷水解酶用于生物转化制备人参二醇型皂苷的工艺

权利要求书

1.制备人参皂苷Gyp XVII、compound O、Mb和F2的方法，包括以人参二醇型皂苷为底物用蛋白质进行催化反应得到含有人参皂苷Gyp XVII、compound O、Mb和F2反应物的步骤，所述蛋白质，是如下a)或b)的蛋白质：

a)氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质；

b)氨基酸序列是SEQ ID No.4的蛋白质；

所述人参二醇型皂苷包括Rb1、Rb2、Rc和Rd。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法包括从所述反应物中纯化得到人参皂苷Gyp XVII、compound O、Mb和F2的步骤。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述以人参二醇型皂苷为底物用蛋白质进行催化反应在液体中进行，所述液体中所述蛋白质和所述人参二醇型皂苷的配比为1IU所述蛋白质：0.5-2mg所述人参二醇型皂苷，所述IU为所述蛋白质的β-糖苷水解酶酶活。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述催化反应进行1-3小时，所述催化反应在25-35℃。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述纯化包括以下步骤：将所述反应物进行离心，使人参皂苷Gyp XVII、compound O、Mb和F2进入上清液中，收集上清液，得到含有人参皂苷Gyp XVII、compound O、Mb和F2的上清液，将所述上清液干燥，得到含有人参皂苷Gyp XVII、compound O、Mb和F2的干燥粉，除去所述干燥粉中的杂质，分别得到人参皂苷Gyp XVII、compound O、Mb和F2。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：除去所述干燥粉中的杂质包括以下步骤：将所述干燥粉溶于溶液A中，得到含有人参皂苷Gyp XVII、compound O、Mb和F2的液体混合物，将所述液体混合物进行硅胶柱层析，用所述溶液A洗脱，分别收集含有人参皂苷Gyp XVII、compound O、Mb和F2的级分，将各所述级分干燥，得到人参皂苷Gyp XVII、compound O、Mb和F2；

所述溶液A由氯仿、甲醇和水组成，所述溶液A中氯仿、甲醇和水的体积比为65:35:10。

7.权利要求1所述方法中的所述蛋白质在制备人参皂苷Gyp XVII、compound O、Mb和F2中的应用。

8.与权利要求1所述方法中的所述蛋白质相关的生物材料在制备人参皂苷Gyp XVII、compound O、Mb和F2中的应用。

9.权利要求1所述方法中的所述蛋白质在催化人参二醇型皂苷制备人参皂苷Gyp XVII、compound O、Mb和F2中的应用；所述人参二醇型皂苷包括Rb1、Rb2、Rc和Rd。

10.与权利要求1所述方法中的所述蛋白质相关的生物材料在催化人参二醇型皂苷制备人参皂苷Gyp XVII、compound O、Mb和F2中的应用；所述人参二醇型皂苷包括Rb1、Rb2、Rc和Rd。