[发明专利]盐酸克伦特罗仿生免疫柱及其检测方法有效

专利信息
申请号: 201510029262.5 申请日: 2015-01-21
公开(公告)号: CN104535759B 公开(公告)日: 2017-02-22
发明(设计)人: 汤轶伟;高子媛;励建荣;闫俊宇;兰建兴;魏立巧;李译;高静纹 申请(专利权)人: 渤海大学
主分类号: G01N33/535 分类号: G01N33/535
代理公司: 沈阳智龙专利事务所(普通合伙)21115 代理人: 宋铁军,周楠
地址: 121000 辽*** 国省代码: 辽宁;21
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摘要:
搜索关键词: 盐酸 克伦特罗 仿生 免疫 及其 检测 方法
【权利要求书】:

1.盐酸克伦特罗仿生免疫柱,其特征在于:包括固相萃取柱(1)、测试层(2)、筛板、固相萃取小柱转接头(5)和注射器(6);固相萃取柱(1)与注射器(6)通过固相萃取小柱转接头(5)连接,筛板分为上筛板(3)和下筛板(4),固相萃取柱(1)内部为测试层(2),测试层(2)的顶端装有上筛板(3),底端装有下筛板(4);测试层(2)为盐酸克伦特罗仿生抗体和石英砂的均匀混合物。

2. 根据权利要求1所述的盐酸克伦特罗仿生免疫柱,其特征在于:固相萃取柱(1)的体积为3mL;筛板为聚丙烯筛板,筛板的孔径为20微米。

3. 根据权利要求1所述的盐酸克伦特罗仿生免疫柱,其特征在于:石英砂为100目。

4. 根据权利要求1所述的盐酸克伦特罗仿生免疫柱,其特征在于:盐酸克伦特罗仿生抗体为通过分子印迹技术制备的分子印迹聚合物,所述分子印迹技术为共价键聚合技术或非共价键聚合技术。

5. 一种如权利要求1所述盐酸克伦特罗仿生免疫柱的检测方法,其特征在于:该方法步骤如下:

(1)活化:磷酸盐缓冲液(PBS)活化;

(2)上样:将盐酸克伦特罗溶液或样品溶液用移液器注入固相萃取柱,利用注射器的空气压力将样品溶液压到测试层;

(3)洗柱:用含有吐温的PBS溶液洗柱;

(4)加入酶标探针;

(5)洗柱:用含有吐温的PBS溶液洗柱;

(6)显色:加入TMB单成分显色剂显色,最后根据测试层颜色深浅判断溶液中盐酸克伦特罗的浓度,颜色越浅,表明样品中盐酸克伦特罗的含量越多。

6. 根据权利要求5所述的盐酸克伦特罗仿生免疫柱的检测方法,其特征在于:步骤(1)活化时所用的PBS的pH值为7.4,活化所用的体积为1mL。

7. 根据权利要求5所述的盐酸克伦特罗仿生免疫柱的检测方法,其特征在于:步骤(2)中上样用盐酸克伦特罗溶液为甲醇溶液,体积为1mL,吸附时间为3分钟。

8. 根据权利要求5所述的盐酸克伦特罗仿生免疫柱的检测方法,其特征在于:步骤(3)中洗柱用的PBS溶液含有体积百分比0.5%的吐温20,用量为1mL。

9. 根据权利要求5所述的盐酸克伦特罗仿生免疫柱的检测方法,其特征在于:步骤(4)加入的酶标探针为盐酸克伦特罗辣根过氧化物酶标记物,用量为1mL 2000倍稀释的PBS,吸附时间为4分钟。

10. 根据权利要求5所述的盐酸克伦特罗仿生免疫柱的检测方法,其特征在于:步骤(5)所用PBS为含有体积百分比0.5%的吐温20,用量为4mL;步骤(6)TMB单成分显色剂的用量为400μL,显色时间为4分钟。

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