[发明专利]过氧合酶变体在审
申请号: | 201480064666.1 | 申请日: | 2014-12-01 |
公开(公告)号: | CN105793418A | 公开(公告)日: | 2016-07-20 |
发明(设计)人: | J·维恩;L·H·厄斯特高;L·德玛利亚;L·卡卢;E·阿穆齐 | 申请(专利权)人: | 诺维信公司 |
主分类号: | C12N9/08 | 分类号: | C12N9/08;C12N15/53;C12P7/04;C12P7/02;C12P7/26;C08G18/32 |
代理公司: | 北京尚诚知识产权代理有限公司 11322 | 代理人: | 顾小曼 |
地址: | 丹麦,*** | 国省代码: | 丹麦;DK |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 过氧 变体 | ||
1.一种过氧合酶变体,包括在与SEQIDNO:2的成熟多肽的位置E16、Y18、P28、P31、 W38、R50、Y72、F92、M94、I98、T100、H102、C103、Y104、H107、L114、A144、F146、M152、F163、 Q167、Y180、T188、W195、M202、Y215、F216、S222、F224、F228、F229、M246、F253、H256、Y258、 Y281、Y287、F308、L317、T319、S345、F346、P347、G348、S349、和G350,优选M94、A144、Y180、 W195、Y215、F224、F228、和F229相对应的一个或多个位置处的取代,其中该变体具有过氧合 酶活性,并且其中该变体与SEQIDNO:2的成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少 70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、 或至少99%但小于100%的序列一致性。
2.如权利要求1所述的变体,该变体是亲本过氧合酶的变体,该亲本过氧合酶选自下 组,该组由以下各项组成:
(a)与SEQIDNO:2的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;
(b)由如下的多核苷酸编码的多肽,该多核苷酸在低严格条件下与(i)SEQIDNO:1的 成熟多肽编码序列、或(ii)(i)的全长互补体杂交;
(c)由与SEQIDNO:1的成熟多肽编码序列具有至少60%一致性的多核苷酸编码的多 肽;以及
(d)SEQIDNO:2的成熟多肽的片段,该片段具有过氧合酶活性。
3.如权利要求2所述的变体,其中该亲本过氧合酶与SEQIDNO:2的成熟多肽具有至少 60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列一致性。
4.如权利要求2或3所述的变体,其中该亲本过氧合酶由以下多核苷酸编码,该多核苷 酸在低严格条件下、中严格条件下、中-高严格条件下、高严格条件下、或非常高严格条件下 与(i)SEQIDNO:1的成熟多肽编码序列或者(ii)(i)的全长互补体杂交。
5.如权利要求2-4中任一项所述的变体,其中该亲本过氧合酶由以下多核苷酸编码,该 多核苷酸与SEQIDNO:1的成熟多肽编码序列具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至 少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%或100%的序列一致性。
6.如权利要求2-5中任一项所述的变体,其中该亲本过氧合酶包括SEQIDNO:2的成熟 多肽或由其组成。
7.如权利要求2-6中任一项所述的变体,其中该亲本过氧合酶是SEQIDNO:2的成熟多 肽的片段,其中该片段具有过氧合酶活性。
8.如权利要求2-7中任一项所述的变体,该变体与该亲本过氧合酶的氨基酸序列具有 至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%一 致性、至少96%、至少97%、至少98%、或至少99%但小于100%的序列一致性。
9.如权利要求1-8中任一项所述的变体,其中取代的数目是1-20个,例如1-10个和1-5 个,如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个取代。
10.如权利要求1-9中任一项所述的变体,该变体包括在对应于位置M94的位置处的取 代;优选地该取代是被Phe取代。
11.如权利要求1-10中任一项所述的变体,该变体包括在对应于位置A144的位置处的 取代;优选地该取代是被Arg取代。
12.如权利要求1-11中任一项所述的变体,该变体包括在对应于位置Y180的位置处的 取代;优选地该取代是被Phe取代。
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