[发明专利]具有诊断和治疗用途的蛋白质

说明书

本发明提供了重组蛋白质，其能够与补体因子H(CFH)结合，并因此与未结合CFH相比，诱导已结合CFH与C3d和C3b之结合的提高。还描述了用于使用所述重组蛋白质的方法和医学装置。

本发明涉及能够与补体因子(complement factor)H相互作用并且调节其活性的蛋白质。本发明还涉及在治疗、诊断和其他应用中使用这样的蛋白质的方法。

背景技术

补体系统是血液中对感染提供第一防线的一组40至50种蛋白质。不恰当调节的补体系统可损害宿主或自身细胞和细菌细胞。因此，其可能造成或加剧许多疾病的症状。因此，对于开发监测或调节补体系统蛋白质的试剂有很大的兴趣。

人补体因子H(complement factor H，CFH)是选择性作用于自身表面(self-surface)以保护其免受补体系统介导的损伤的蛋白质。然而，许多病原体可将宿主CFH用于其自身目的。对CFH(由20个补体控制蛋白(complement control protein，CCP)模块组成，所述模块也称为短共有序列重复(short consensus repeat，SCR)或sushi结构域)如何与相关微生物蛋白相互作用的研究已经提供了关于如何通过实验室中产生的多肽捕获CFH以及调节其活性的线索。

PspC是肺炎球菌表面蛋白的四个名称中的一个，所述蛋白的基因存在于全部肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)菌株中的约75％中。在名称SpsA下，已示出该蛋白质结合分泌性免疫球蛋白A(S.Hammerschmidt，S.R.Talay，P.Brandtzaeg和G.S.Chhatwal，Mol.Microbiol.25：1113-1124，1997)。在名称CbpA下，已示出蛋白质与人上皮细胞和内皮细胞相互作用(C.Rosenow等，Mol.Microbiol.25：819-829，1997)。改基因与肺炎链球菌中的PspA基因旁系同源，并因此称为PspC(A.Brooks-Walter，R.C.Tart，D.E.Briles和S.K.Hollingshead，1997年美国微生物学会第97届全体大会的摘要(Abstracts of the97th General Meeting of the American Society for Microbiology 1997))。在名称HIC下，已示出蛋白质与人因子H相互作用(Janulczyk R.，Iannelli F.，Sjoholm A.G.，Pozzi G.，Bjorck L.J.Biol.Chem.275：37257-37263，2000)。以下中提供了对PspC的详细描述：Brooks-Walter等，“The pspC Gene of Streptococcus pneumoniae Encodes aPolymorphic Protein，PspC，Which Elicits Cross-Reactive Antibodies to PspA andProvides Immunity to Pneumococcal Bacteremia”Infect Immun.1999年12月；67(12)：6533-6542.PMCID：PMC97064。在该论文中，5个已公开的和7个新的等位基因的序列比较揭示，该基因是镶嵌结构，模块化结构域在进化过程中有助于基因多样性。存在两个主要进化枝：进化枝A等位基因较大并且包含与许多PspA等位基因共有的额外模块；进化枝B等位基因较小并且缺少该PspA样结构域。所有等位基因具有富脯氨酸结构域和胆碱结合重复结构域，其示出与PspA蛋白中的类似结构域0％的趋异性。

本发明人制备了肺炎链球菌PspC截短物(PspCN)，其主要通过与CCP 8-10的相互作用来不可逆地(在生物学时间标尺上)结合CFH。PspCN捕获的CFH采用这样的构象，其中化学交联剂可以使其CCP 5和CCP 18以及其CCP 7和CCP 20结合；有趣的是，CCP 7和CCP 20介导其自身表面识别，并且是多种其他CFH相互作用细菌的双重结合位点。