[发明专利]重组马立克氏病病毒及其用途

说明书

本发明涉及重组病毒及其用途。更具体来说，本发明涉及编码目标多肽的新的重组马立克氏病病毒，以及它们在表达这种多肽或将这种多肽递送到动物、尤其是家禽中的用途。本发明特别适合于给家禽接种疫苗以对抗禽类病原体。

技术领域

本发明涉及重组病毒及其用途。更具体来说，本发明涉及编码目标多肽的新的重组马立克氏病病毒，以及它们在表达这种多肽或将这种多肽递送到动物、尤其是家禽中的用途。本发明特别适合于给家禽接种疫苗以对抗禽类病原体。

背景技术

家禽的肉和蛋是重要的食物来源，它们的消费量由于人口增长和它们极大的性价比而持续增加。最近禽流感的流行使公共舆论聚焦于家禽健康以及食品安全和保障。家禽疫苗技术变得在世界范围内受到关注。

表达病原体蛋白的重组病毒常常被用作对抗目标病原体的家禽疫苗。包含这些病毒的疫苗引起外来病原体蛋白或其片段在被感染细胞内表达，这随后可以诱导特异性和保护性的体液免疫和细胞介导的免疫。

已知不同病毒可以在被感染动物体内以潜伏或持续感染的状态存活。因此，这些已整合有源自于病原体的外来基因的病毒，已被开发用作以病毒为载体的疫苗，增加被免疫接种的动物的免疫持续时间。

这些病毒载体(或重组病毒)通常是基于禽痘病毒例如禽痘(EP-A-0,517,292)、疱疹病毒例如血清1、2和3型马立克氏病病毒(HVT)(例如WO-A-87/04463、5,980,906、5,853,733)或可选地新城疫病毒(NDV)和禽腺病毒。

这些重组禽病毒展现出各种不同的保护水平。表达IBDV VP2的重组HVT显示出超过经典IBD疫苗(IBD)的优点。引起注意的其他HVT载体表达NDV(ND)或ILTV(LT)抗原。

基于HVT的重组病毒的现实问题之一是当将几种病毒组合使用以提供针对不同病原体的免疫原性时它们的干扰。事实上，当将表达不同抗原的两种不同rHVT混合时，引起至少针对一种疾病的较低的保护(参见例如Slacum G等，2009，HVT重组体与其他马立克氏病病毒的相容性(The compatibility of HVT recombinants with other Marek's diseasevaccines)，58th Western Poultry Disease Conference,Sacramento,CA,USA,3月23日至25日,p 84)。

因此，对于在动物尤其是家禽中改进疫苗接种，允许同时针对几种疾病提供保护的新方法，存在着需求。

已开发了多价HVT载体，其可以表达两种不同的抗原肽(参见PCT/EP2013/056839)。

本发明公开了新的重组病毒，其适合于在动物中诱导强的免疫保护，并且此外可以与其他病毒疫苗组合使用以产生扩展的免疫。

发明概述

本发明涉及可以编码一种或几种目标多肽的重组马立克氏病病毒(“MDV”)。更具体来说，本发明公开了包含β-肌动蛋白来源的启动子的改进的MDV病毒，并且令人吃惊地显示，在这些病毒的情形中，这样的构建体允许高度提高的表达并诱导强的保护性免疫。本发明还显示，这样的病毒对于与不同的禽疱疹病毒组合使用以诱导针对不同抗原性病原体的提高的免疫应答而没有显著的交叉干扰来说，是相容的。

因此，本发明的目的在于一种重组马立克氏病病毒(“rMDV”)，其包含可操作连接到源自于鸡β-肌动蛋白启动子的启动子的编码目标多肽的重组核苷酸序列。

本发明的另一个目的是一种重组马立克氏病病毒，其包含：(1)包含鸡β-肌动蛋白启动子的核心序列的启动子，以及(2)在所述启动子控制下编码多肽的重组核苷酸序列。