[发明专利]鉴定细胞群体、特别是间充质干细胞群体的多色流式细胞术方法在审
申请号: | 201480039777.7 | 申请日: | 2014-05-20 |
公开(公告)号: | CN105378066A | 公开(公告)日: | 2016-03-02 |
发明(设计)人: | M·J·埃文斯;A·雷金纳德;S·苏丹 | 申请(专利权)人: | 细胞治疗有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;G01N33/50 |
代理公司: | 北京三友知识产权代理有限公司 11127 | 代理人: | 庞东成;武胐 |
地址: | 英国*** | 国省代码: | 英国;GB |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鉴定 细胞 群体 特别是 间充质 干细胞 多色 方法 | ||
1.一种鉴定细胞群体中的间充质干细胞(MSC)的方法,该方法包括:利用荧光活化细胞分选(FACS)同时鉴定所述群体中的在其表面展示出可检测水平的CD73、CD90和CD105而不展示可检测水平的CD14、CD19、CD34和CD45的细胞,并由此鉴定出细胞群体中的间充质干细胞(MSC)。
2.一种鉴定细胞群体中的特定细胞类型的方法,该方法包括:利用FACS同时鉴定在所述群体中的细胞的表面上是否存在七种以上的指示所述特定细胞类型的细胞表面标志物。
3.如权利要求2所述的方法,其中,所述方法包括:鉴定在所述群体中的细胞表面上是否存在十种以上的指示所述特定细胞类型的细胞表面标志物。
4.如权利要求2或3所述的方法,其中,所述特定细胞类型是间充质干细胞(MSC),其中所述方法包括同时鉴定是否存在CD73、CD90、CD105、CD14、CD19、CD34和CD45,且其中细胞表面上存在可检测水平的CD73、CD90和CD105且不存在可检测水平的CD14、CD19、CD34和CD45指示该细胞为MSC。
5.如权利要求4所述的方法,其中,所述方法还包括鉴定是否存在可检测水平的CD181和CD184,且其中细胞表面上存在可检测水平的CD181和CD184指示该细胞为MSC的特定亚型。
6.如权利要求2或3所述的方法,其中所述特定细胞类型是中胚层谱系祖细胞,其中所述方法包括鉴定是否存在CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD271、CD14、CD34和CD45,且其中细胞表面上存在可检测水平的CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和CD271且不存在可检测水平的CD14、CD34和CD45指示该细胞为中胚层谱系祖细胞。
7.如权利要求6所述的方法,其中所述方法还包括鉴定是否存在1型C-X-C趋化因子受体(CXCR1)、CXCR2或CXCR4,且其中细胞表面上存在可检测水平的CXCR1、CXCR2或CXCR4指示该细胞能够迁移至患者中的特定受损组织。
8.如权利要求7所述的方法,其中细胞表面上存在可检测水平的CXCR4指示该细胞能够迁移至患者中的受损的心肌组织、肾组织或骨组织。
9.如权利要求2或3所述的方法,其中所述特定细胞类型是成纤维细胞,其中所述方法包括特别鉴定是否存在CD10、CD29和CD106,且其中细胞表面上存在可检测水平的CD10、CD29和CD106指示该细胞为成纤维细胞。
10.如权利要求2或3所述的方法,其中所述特定细胞类型是极小胚胎/外胚层样干细胞(VSEL),其中所述方法包括鉴定是否存在可检测水平的Sca-1、CD45R、Gr-1、TCRαβ、TCRγδ、CD11b、Ter119和Oct-4,且其中细胞表面上存在可检测水平的Sca-1、CD45R、Gr-1、TCRαβ、TCRγδ、CD11b、Ter119和Oct-4指示该细胞为VSEL。
11.如权利要求2或3所述的方法,其中所述特定细胞类型是造血干细胞(HSC),其中所述方法包括特别鉴定是否存在可检测水平的CD133,且其中细胞表面上存在可检测水平的CD133指示该细胞为HSC。
12.如权利要求2或3所述的方法,其中所述特定细胞类型是内皮祖细胞(EPC),其中所述方法包括特别鉴定是否存在可检测水平的KDR、VE-钙粘蛋白和CD31,且其中细胞表面上存在可检测水平的KDR、VE-钙粘蛋白和CD31指示该细胞为EPC。
13.如权利要求2或3所述的方法,其中所述特定细胞类型是组织定向干细胞,其中所述方法包括特别鉴定是否存在可检测水平的CD117+、CD184、c-met和AC133,且其中细胞表面上存在可检测水平的CD117+、CD184、c-met和AC133指示该细胞为组织定向干细胞。
14.一种用于鉴定细胞群体中的间充质干细胞(MSC)的试剂盒,该试剂盒包括七种以上带荧光标记的抗体,其中所述试剂盒中的至少一种抗体与CD73、CD90、CD105、CD14、CD19、CD34和CD45中的每一种特异性结合。
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