[发明专利]流动池的对准方法和系统有效
申请号: | 201480028007.2 | 申请日: | 2014-03-11 |
公开(公告)号: | CN105474236B | 公开(公告)日: | 2019-06-25 |
发明(设计)人: | 大卫·雷·斯图普斯;菲利浦·艾伦·维奇;史蒂文·杰弗瑞·戈登 | 申请(专利权)人: | 凯杰科技有限公司 |
主分类号: | G06T15/00 | 分类号: | G06T15/00;G06K9/58;G06K9/64;G01N21/76 |
代理公司: | 北京派特恩知识产权代理有限公司 11270 | 代理人: | 景鹏;姚开丽 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 流动 对准 方法 系统 | ||
1.一种由成像器使用的对准方法,其中所述成像器对流动池上的脱氧核糖核酸(DNA)片段进行成像,所述成像器捕捉分片中的DNA片段微珠位置处的强度值,每个分片在所述流动池中都具有参考位置,所述方法包括:
在第一次成像会话期间,获得每个分片的暗场像;
在所述第一次成像会话期间,识别出第一分片内的微珠的x位置和y位置的第一暗场群和第二分片内的微珠的x位置和y位置的第二暗场群;
在第二次成像会话期间,识别出与所述第一暗场群和所述第二暗场群对应的群;
在所述第二次成像会话期间,改变至少一个分片的参考位置以校正对应的第一暗场群中的线性偏移;以及
应用至少一个校正系数,以从成像器读出所述流动池中的微珠位置的强度值,以校正由对应的第一暗场群和第二暗场群中的偏移所确定的角度偏移。
2.根据权利要求1所述的方法,进一步包括:
在所述第二次成像会话期间,获得所述流动池的每个分片的荧光场图像;
经过应用至少一个校正系数进行校正,读出在暗场像中识别出的微珠位置处的荧光场图像的强度值。
3.根据权利要求2所述的方法,其中,获得所述流动池的每个分片的荧光场图像的步骤包括:
基于所述分片的改变后的参考位置,定位所述流动池,以进行荧光成像;
用第一颜色的光照射所述分片;
捕捉由该分片发射出的光;
通过将所述发射出的光的一部分与所述暗场像的对应部分进行匹配,确定至少一个附加的校正系数;
应用所述至少一个附加的校正系数,以读出强度值;
其中,读出经过所述至少一个校正系数和所述至少一个附加的校正系数校正的强度值。
4.根据权利要求3所述的方法,其中,获得每个分片的荧光场图像的步骤进一步包括:
用第二颜色的光照射所述分片;
捕捉由该分片发射出的光;
通过将所述发射出的光的一部分与所述暗场像的对应部分进行匹配,确定至少一个附加的校正系数;
应用所述至少一个附加的校正系数,以读出强度值;
其中,读出与用第二颜色的光照射所述分片相关联的、经过所述至少一个校正系数和所述至少一个附加的校正系数校正的强度值。
5.根据权利要求1所述的方法,其中,所述流动池按72个分片进行成像,所述72个分片包括3行,每行中有24个分片,所述第一分片和所述第二分片位于中间行中,并且所述第二分片与所述第一分片相距至少5个分片。
6.根据权利要求5所述的方法,其中,所述第二分片与所述第一分片相距至少9个分片。
7.一种由成像器使用的对准方法,其中所述成像器对流动池上的脱氧核糖核酸(DNA)片段进行成像,所述成像器捕捉分片中的DNA片段微珠位置处的强度值,每个分片在所述流动池中都具有参考位置,所述方法包括:
在第一次成像会话期间,定位所述流动池,以通过所述成像器进行成像;
在所述第一次成像会话期间,获得所述流动池的每个分片的微珠位置的暗场像;
在所述第一次成像会话期间,识别出第一分片内的微珠的x位置和y位置的第一暗场群和第二分片内的微珠的x位置和y位置的第二暗场群;
在第二次成像会话期间,重新定位所述流动池,以通过所述成像器进行成像;
在所述第二次成像会话期间,识别出所述第一分片内的与所述第一暗场群对应的第三暗场群和所述第二分片内的与所述第二暗场群对应的第四暗场群;
确定在所述第一暗场群与所述第三暗场群之间的第一偏移以及在所述第二暗场群与所述第四暗场群之间的第二偏移;
在所述第二次成像会话期间,改变至少一个分片的参考位置,以校正所述第一偏移;以及
应用至少一个校正系数,以从所述成像器读出所述流动池中的微珠位置的强度值,以校正所述第一偏移与所述第二偏移之间的差值。
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