[发明专利]用于同时糖化和发酵乳清渗透物的方法

权利要求书

1.一种用于从包含乳糖的底物中生产乙醇的方法，该方法包括在从3.5-5.5的pH下，使 用发酵生物，同时地糖化该底物以产生单糖并且发酵该单糖以产生乙醇，其中糖化是在乳 糖酶的存在下进行，并且其中该发酵生物是酵母菌属物种，并且用于获得存在于该底物中 的乳糖的至少90％水解的孵育时间(t₁)与总发酵时间(t₂)之间的比率是在0.1至1的范围 内，并且以如下量添加该酵母菌属物种，这些量将导致在发酵结束时乙醇产率为至少70％ w/w的乳糖的理论乙醇产率。

2.根据权利要求1所述的方法，其中t₁/t₂是在从0.2至1的范围内，具体是0.3至1，并且 更具体是0.35至0.95。

3.根据权利要求1-2所述的方法，其中调节该乳糖酶活性以在5至150小时内，具体是10 至130小时、具体是30至120小时、更具体是40至100小时、更具体是50至75小时内，提供该乳 糖底物的至少90％的水解。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中该发酵时间是在从10-200小时的范围 内，具体是20-150小时，更具体是30-130小时，更具体是40-120小时，甚至更具体是50-100 小时。

5.根据权利要求1所述的方法，其中该乳糖酶活性是在从0.05至10.0LAU(A)/gDS的范 围内，更具体是从0.1至5.0LAU(A)/gDS，具体是0.25至3.0LAU(A)/gDS，具体是0.5至2LAU (A)/gDS，并且甚至更具体是在从0.7至1.2LAU(A)/gDS的范围内。

6.根据权利要求1所述的方法，其中该酵母菌属物种发酵生物是在包括半乳糖的溶液 中进行扩增的。

7.根据权利要求6所述的方法，其中该溶液包括1％至20％的半乳糖，优选是2％至15％ 的半乳糖、5％至10％的半乳糖。

8.根据权利要求6-7所述的方法，其中预孵化至少6小时，具体是至少12小时，更具体是 至少24小时。

9.根据权利要求6-8所述的方法，其中调节该乳糖酶活性以在5至100小时内，具体是10 至90小时、具体是20至80小时、更具体是30至70小时内，提供该乳糖底物的至少90％的水 解。

10.根据权利要求6-9中任一项所述的方法，其中该发酵时间是在从10-100小时的范围 内，具体是20-90小时，更具体是40-80小时，更具体是50-75小时，甚至更具体是60-70小时。

11.根据任何权利要求6-10所述的方法，其中该乳糖酶活性是在从0.05至10.0LAU(A)/ gDS的范围内，更具体是从0.1至5.0LAU(A)/gDS，具体是0.5至3.0LAU(A)/gDS，具体是 1.0至2.0LAU(A)/gDS的范围内。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的方法，其中该酵母菌属物种是酿酒酵母。

13.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中该干固体含量DS为至少12％，更具体 是至少13％，更具体是至少14％，更具体是至少15％，甚至更具体是至少20％。

14.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中该包含乳糖的底物是乳清渗透物、酸 乳清、或乳。

15.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中该乳糖酶是从双岐杆菌属的菌株或 从曲霉属中获得的。

16.根据权利要求15所述的方法，其中该乳糖酶是从两歧双歧杆菌、或米曲霉中获得 的。

17.根据权利要求1-16中任一项所述的方法，其中该乳糖酶选自SEQIDNO:2的成熟多 肽，或是与SEQIDNO:2的成熟多肽具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少 98％、至少99％或100％序列一致性的乳糖酶。