[发明专利]抗体-尿素酶偶联物在诊断和治疗中的应用

说明书

技术领域

本发明公开的内容提供了具有治疗和诊断效用的抗体-尿素酶偶联物。更加具体而言，本发明公开的内容涉及通过将一个或多于一个完全抗体与尿素酶偶联而制备的诊断偶联物和/或治疗偶联物。

背景技术

癌症占美国总死亡率的五分之一，并且是第二致死病因。癌症通常由细胞群的不受控的分化来表征。这种不受控的分化可涉及血细胞，例如各种不同类型的淋巴瘤，或在特定组织或器官中聚集的或特定组织或器官本身具有的细胞，例如，实体瘤，所述实体瘤例如，继发性或原发性乳腺肿瘤、肺肿瘤、肝肿瘤、食道肿瘤、胃肿瘤、肠肿瘤、脑肿瘤、骨肿瘤或前列腺肿瘤。

多种治疗方式已计划用于癌症治疗。一种这样的治疗方式涉及使用特定酶抑制癌细胞的生长。本领域已知的一种这样的酶是尿素酶，其是催化尿素水解成二氧化碳和氨的酶。更加具体而言，尿素酶催化尿素水解以生成氨和氨基甲酸盐，生成的氨基甲酸盐随后通过自发水解作用降解而生成另一氨和碳酸。就这点而言，尿素酶的活性倾向于增加其所在的局部环境的pH值，因为尿素酶产生氨，氨为碱性分子。

在本领域中，已意识到在治疗癌症中使用靶向肿瘤相关抗原的抗体的概念有一段时间(Herlynet.al.,(1980)CancerResearch40,717)。然而，就尿素酶而言，毒性成分是尿的酶降解产生的碱性环境。在这种情况下，所使用的抗体仅需要具有对对应抗原的高结合亲和性。虽然治疗性抗体可与尿素酶一同使用，但是，目前正在进行的临床试验仅仅使用了高亲和性抗体片段。这种方式产生了若干独特的考虑因素，包括尿素酶是非常大的酶而抗体片段显著较小这一事实。为了解决由尿素酶的尺寸产生的可能的空间位阻，常规使用非人类抗体片段的多个拷贝。

因为这些片段的多个拷贝被用于确保合适的结合，需要限制抗体上所包括的其他成分。而且，因为抗体片段上的结合位点可能有限，所以通过单一栓系(tether)使各个抗体片段与尿素酶结合。而且，虽然抗体片段的免疫原性看起来最小，但是非免疫原性方式会消除不良免疫反应的甚至最小的可能性或消除联合给药免疫抑制剂的需要。

发明内容

本发明公开的内容涉及抗体-尿素酶偶联物。所述偶联物包括共价结合至尿素酶的一个或两个抗体，所述抗体与尿素酶共价结合从而形成抗体-尿素酶偶联物，所述偶联物任选地包括与所述尿素酶或所述抗体结合的一个或多于一个治疗剂。

在一种实施方式中，本发明提供抗体-尿素酶偶联物，该偶联物包含共价结合至尿素酶的抗体，所述抗体共价结合至尿素酶从而形成抗体-尿素酶偶联物。一方面，所述偶联物还包含共价结合至所述抗体或所述尿素酶的治疗剂。

一方面，所述抗体-尿素酶偶联物包括共价结合至所述尿素酶的至少两个抗体。在一些方面，所述抗体中的至少一个在两个或多于两个位点处共价结合至所述尿素酶。在一些方面，所述抗体中的至少一个在三个或多于三个位点处共价结合至所述尿素酶。在一些方面，抗体中的每一个在两个或多于两个位点处共价结合至所述尿素酶。

在一些方面，所述抗体中的至少一个是完全抗体。在一些方面，所述完全抗体包括至少两个Fab片段和Fc片段。在一些方面，所述完全抗体的分子量为至少120kDa，或130kDa，或140kDa或150kDa。在一些方面，所述完全抗体在两个或多于两个位点处共价结合至所述尿素酶。

在一些方面，所述抗体不指向异常朊病毒。

本发明的这些方面和其他方面在下文中进一步描述。

具体实施方式

释义

应当注意地是，除非上下文另有明确说明，本文以及后附的权利要求书中所使用的单数形式(“a”，“an”和“the”)包括复数指代物。因此，例如，涉及“溶剂(solvent)”的内容包括多种这样的溶剂。

本文使用的术语“包含(comprising或comprises)”是指组合物和方法包括所记载的元素，但是不排除其他元素。当使用“基本由……构成”限定组合物和方法时，其是指排除对用于所述目的的组合具有实质性意义的其他元素。因此，基本由本文限定的元素构成的组合物或工艺不排除对要求保护的内容的基本特性和新特性不产生实质性影响的其他物质或步骤。“由……构成”是指排除超过痕量元素的其他成分和实质性方法步骤。由这些过渡术语中的每一个限定的实施方式在本发明公开的内容的范围内。