[发明专利]一种具有还原/酶双响应和靶向性的介孔硅纳米粒子的制备方法

权利要求书

1.一种具有还原/酶双响应和靶向性的介孔硅纳米粒子的制备方法，包括：

(1)将介孔硅复合纳米粒子超声分散在溶剂中，加入偶联剂，在80～90℃条件下，回流反应6-12h，得到氨基化复合粒子；其中介孔硅复合粒子和偶联剂的质量比为(1～3)：1；

(2)将上述氨基化复合粒子分散在溶剂中，加入酸酐，在室温条件下，搅拌反应24-48h，得到表面羧基化的复合粒子；其中氨基化复合粒子、酸酐的质量比为(0.1～0.5):(1～6)；

(3)将上述表面羧基化的复合粒子分散在缓冲溶液中，然后加入EDC/NHS或DCC/DMAP，混匀后加入二硫键的连接剂，30-60℃条件下，反应12-48h，得到含二硫键连接剂的复合粒子，其中表面羧基化的复合粒子、二硫键的连接剂的质量比约为0.1～1：(1～5)；

(4)将上述含二硫键连接剂的复合粒子、透明质酸HA、EDC、NHS混合于去离子水中，调节pH为8-10，室温条件下搅拌24-48h，得到透明质酸包裹的复合粒子；其中二硫键连接剂的复合粒子、透明质酸HA、EDC、NHS的质量比为80～100:20～30:10～15:8～12；

(5)将氨基化聚乙二醇和上述透明质酸包裹的复合粒子分散在溶剂中，室温反应12-24h，反应毕，得到复合纳米粒子载体，然后同抗癌药物溶液混合，即得具有还原/酶双响应和靶向性的介孔硅纳米粒子；其中抗癌药物和复合纳米粒子载体的重量比为(5～10)：1。

2.根据权利要求1所述的一种具有还原/酶双响应和靶向性的介孔硅纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中介孔硅复合纳米粒子为介孔硅包裹的单个或多个粒径为5-50nm的纳米粒子；溶剂为无水乙醇；偶联剂为KH-550。

3.根据权利要求2所述的一种具有还原/酶双响应和靶向性的介孔硅纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述介孔硅复合纳米粒子为磁性纳米粒子、上转换纳米粒子、金纳米粒子中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的一种具有还原/酶双响应和靶向性的介孔硅纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中溶剂为二甲基亚砜DMSO；酸酐为琥珀酸酐。

5.根据权利要求1所述的一种具有还原/酶双响应和靶向性的介孔硅纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中缓冲溶液为PBS缓冲液，pH为5-6；二硫键的连接剂为胱胺二盐酸盐或2-羟乙基二硫化物。

6.根据权利要求1所述的一种具有还原/酶双响应和靶向性的介孔硅纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中EDC/NHS中EDC和NHS的比例为(2～4)：1；DCC/DMAP中DCC和DMAP的比例为(1～2)：1；表面羧基化的复合粒子和EDC/NHS或DCC/DMAP的比例为0.1～1g：50-80mmol。

7.根据权利要求1所述的一种具有还原/酶双响应和靶向性的介孔硅纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中三乙胺调节pH值；透明质酸的分子量为50～200kDa。

8.根据权利要求1所述的一种具有还原/酶双响应和靶向性的介孔硅纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中氨基化聚乙二醇的分子量为5kDa；溶剂为乙醇。

9.根据权利要求1所述的一种具有还原/酶双响应和靶向性的介孔硅纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中抗癌药物为阿霉素、地塞米松、洛莫司汀、卡莫司汀、卡培他滨、紫杉醇、羟基喜树碱中的一种或几种；抗癌药物溶液的浓度为0.1～1mg/mL。

10.根据权利要求1所述的一种具有还原/酶双响应和靶向性的介孔硅纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中具有还原/酶双响应和靶向性的介孔硅纳米粒子在制备癌症诊断化疗一体化药物中的应用。