[发明专利]一种从西红花中分离纯化西红花酸单体的方法

权利要求书

1.一种从西红花中分离纯化西红花酸单体的方法，其特征在于包括如下工艺步骤：

（1）提取

取西红花药材，加入体积百分比浓度为95%的乙醇溶液，加入量按照药材重量:乙醇溶液体积=1Kg:10L计算，室温浸泡提取3-4次，每次2小时，过滤，收集、合并滤液；

（2）浓缩

将步骤（1）收集、合并的滤液，旋蒸减压回收乙醇，浓缩后的固体转移至容器中50℃鼓风干燥5-8小时，得浓缩至干固体，待下一步处理；

（3）酶解转化

取步骤（2）干燥后的固体，并与纤维素酶以质量比1:1加入到pH5.2的醋酸-醋酸钠缓冲液中，然后置于温度50℃、频率60r/min的水浴恒温振荡器中转化反应24-36小时，反应完成后放置至室温，转化物析出并沉淀；所述醋酸-醋酸钠缓冲液的体积用量为干燥固体质量的30倍；

（4）固体过滤、干燥

将步骤（3）酶解转化后的沉淀用滤纸过滤，固体放入鼓风干燥箱中50℃干燥5-8小时至干；

（5）DMF结晶、过滤

将步骤（4）干燥后的固体加入为其重量30倍体积的DMF中，放入50℃水浴锅中热溶后，溶液滤纸过滤，滤液再放入冰箱中冷冻析晶；

（6）产品回收

将步骤（5）冷冻析晶溶液用滤纸过滤，固体放入鼓风干燥箱中50℃干燥，得纯度98%以上的西红花酸单体。

2.根据权利要求1所述的从西红花中分离纯化西红花酸单体的方法，其特征在于：

步骤（3）中所述pH5.2醋酸-醋酸纳缓冲液的配制方法为：取7.9mL 0.2mol的醋酸钠溶液，加入到2.1mL 0.1mol的醋酸溶液中，即可得10mLpH等于5.2的醋酸-醋酸钠溶液。

3.根据权利要求1或2所述的从西红花中分离纯化西红花酸单体的方法，其特征在于：步骤（5）中所述冷冻析晶的温度为-5℃～-20℃。

4.根据权利要求1所述的从西红花中分离纯化西红花酸单体的方法，其特征在于：包括如下工艺步骤：

（1）提取

取西红花药材50g，加入500mL 体积百分比浓度为95%的乙醇溶液，浸泡提取3次，每次2小时，过滤，收集、合并滤液；

（2）浓缩

将步骤（1）收集、合并的滤液，旋蒸减压回收乙醇，浓缩后的固体转移至容器中50℃鼓风干燥5-8小时，得浓缩至干固体8克，待下一步处理；

（3）酶解转化

取步骤（2）干燥后的固体8克与8克纤维素酶，加入240mL pH5.2醋酸-醋酸钠缓冲液中，置于温度50℃、频率60r/min的水浴恒温振荡器中转化反应24小时，反应完成后放置至室温，转化物析出并沉淀；

（4）固体过滤、干燥

将步骤（3）酶解转化后的沉淀用滤纸过滤，固体放入鼓风干燥箱中50℃干燥5-8小时至干，得干燥后的固体3克；

（5）DMF结晶、过滤

将步骤（4）干燥后的固体3克加入150mL DMF中，放入50℃水浴锅中热溶，溶液滤纸过滤，滤液再放入-5℃～-20℃冰箱中冷冻析晶；

（6）产品回收

将步骤（5）冷冻析晶溶液用滤纸过滤，固体放入鼓风干燥箱中50℃干燥，得到西红花酸单体1.3克；

整个生产流程用时3天；

计算得产品收率为1.3/50×100%=2.6%；

利用反相分析型液相色谱RP-HPLC复检产品纯度，测得结果为99.08%。