[发明专利]一种高产角鲨烯的类酵母菌及其应用有效
申请号: | 201410829522.2 | 申请日: | 2014-12-26 |
公开(公告)号: | CN104560731B | 公开(公告)日: | 2018-10-09 |
发明(设计)人: | 崔球;宋晓金;谭延振;王晓龙;冯银刚;李文利 | 申请(专利权)人: | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P5/02;C12R1/645 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 周秀梅;李颖 |
地址: | 266101 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 类酵母菌 保藏 角鲨烯 中国微生物菌种 高密度发酵 海洋微生物 微生物中心 工艺操作 应用技术 菌株 发酵 应用 高产 生产 分类 海洋 管理 | ||
1.一种高产角鲨烯的类酵母菌,其特征在于:类酵母菌分类命名为类酵母菌(Pseudozyma sp.),已保藏于位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号为CGMCC No:9687,保藏日期为2014年9月19日;所述类酵母菌ITS区域序列为SEQ ID NO.1。
2.一种权利要求1所述的高产角鲨烯的类酵母菌的应用,其特征在于:所述类酵母菌在发酵生产角鲨烯中的应用。
3.一种高密度发酵生产角鲨烯的方法,其特征在于:以权利要求1所述的CGMCC No:9687菌株为出发菌株,在液体培养基中高密度发酵,分离得到菌体细胞,将菌体细胞经破碎、萃取、精制获得角鲨烯。
4.按权利要求3所述的高密度发酵生产角鲨烯的方法,其特征在于:
①将保存在甘油管的菌株接种于种子培养基中,接种量3-5%v/v,在20-30℃,以150-200rpm的转速,培养24-48h,获得一级种子;
②将一级种子接入种子培养基中,接种量3-5%v/v,在20-30℃,以150-200rpm的转速,培养24-48h,获得二级种子;
③将二级种子液接入发酵培养基中,接种量2-10%v/v,通气量0.2-2vvm,搅拌转速200-800rpm,罐温15-37℃,pH 4-9,发酵60-120h,发酵生产角鲨烯;
所述发酵培养基中包含如下组分:葡萄糖20-120g/L,酵母提取物0.2-30g/L,蛋白胨0.2-20g/L,磷酸二氢钾0.5-8g/L,硫酸镁0.5-5g/L,海水晶5-30g/L,维生素B1 3-200mg/L,维生素B6 3-200mg/L,维生素B12 1-50mg/L,生物素1-50mg/L。
5.按权利要求4所述的高密度发酵生产角鲨烯的方法,其特征在于:所述种子培养基中,碳源含量为30-60g/L,氮源含量为10-20g/L,溶剂为质量比1:1的海水和蒸馏水的混合物。
6.按权利要求5所述的高密度发酵生产角鲨烯的方法,其特征在于:所述碳源为葡萄糖、甘油、果糖、木糖、蔗糖、麦芽糖、糖蜜、淀粉糖化液或木质纤维素糖化液;所述氮源为有机氮源或无机氮源。
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