[发明专利]一种丹参叶提取物的制备方法及检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种丹参提取物的制备方法及检测方法，特别涉及一种丹参叶提取物的制备方法及检测方法。

背景技术

丹参始载于《神农本草经》，列为上品，“一味丹参，功同四物”(地黄、当归、白芍、川芎)，传统医药认为：丹参集养血、活血、化瘀、止痛、生新血于一体，功效显著且性味平和，有补有散，无毒副作用，丹参具有活血调经，祛瘀止痛，凉血消痈，清心除烦，养血安神的功效。不少中药处方中均有丹参配伍使用，丹参中的主要有效成分丹酚酸B为三分子丹参素与一分子咖啡酸缩合而成，是目前研究较多的丹酚酸之一，对心、脑、肝、肾等器官均具有重要药理作用，丹酚酸B具有很强的抗氧化作用。体内外实验证明，丹酚酸B能清除氧自由基、抑制脂质过氧化反应，其作用强度高于维生素C、维生素E、甘露醇，是目前已知的抗氧化作用最强的天然产物之一,对心脑血管疾病也有良好的疗效，另外，其在保健品和化妆品中也有很重要的作用，因其用途越来越多，所以其需求量也越来越大。

丹参一般以其根入药，其叶一般作为牛羊饲料或者直接作为废弃物在田间烧掉，造成巨大的浪费甚至污染环境。但近年来，人们发现丹参叶中也含有不少有效成分，其含有的丹参素、丹酚酸A和丹酚酸B等都是药品、保健品和化妆品行业很有用的物质，所以丹参叶中有效成分的提取越来越受到人们的关注。

但是，丹参叶中的主要有效成分丹酚酸B的热稳定性不高，在高于60℃的温度下10分钟左右即损失80％以上，所以普通的提取方法达不到提取丹参叶中的有效成分来加以利用的目的。目前，丹参叶中有效成分丹酚酸B的提取方法还存在很大的难度，如提取过程中有效成分损失很大、提取后无法制成高浓度干品、提取过程太繁琐、提取过程有易燃易爆危险等。

发明内容

本发明的目的是提供一种丹参叶提取物的制备方法及检测方法，该制备方法能有效利用作为牛羊饲料或者废弃物的丹参叶提取出价值极高的丹酚酸B，变废为宝，避免了浪费，还可降低因大量的燃烧引起的环境污染，并且，该提取方法能够有效的保持主要有效成分丹酚酸B的活性，扩大产量，也减少了成本，而检测方法针对丹参茎叶的提取物进行成分检测和含量检测，以此有效的监测丹参叶提取物的产量及活性。

本发明采用的技术方案如下：

丹参叶提取物的制备方法：

取丹参叶，粉碎成粗粉，置渗滤罐中，取粗粉重量4～6倍的30～70％乙醇，加入渗滤罐至乙醇液面高出丹参叶粗粉1～10厘米，于10～30℃浸泡20～50小时，以每分钟40～100ml的速度放出渗滤液，同时将剩余乙醇从以同样的速度向粗粉中加入，收集渗滤液，滤过，滤液于45～55℃减压回收乙醇，制成相对密度为1.05～1.15的丹参叶清膏，用真空喷雾干燥器于80～90℃喷雾干燥，收集干膏粉，得丹参叶提取物。

其中：所述的乙醇用量优选粗粉重量的5倍。

所述乙醇的浓度优选50％。

所述浸泡的温度优选25℃。

所述浸泡时间优选35小时。

所述减压回收温度优选50℃。

所述真空喷雾干燥温度优选85℃。

本发明所述的丹参叶提取物的检测方法，该检测方法含性状、成分检测、含量检测项目的部分或全部，其中：

性状：应为黄棕色至棕褐色的颗粒；

成分检测：以丹参素对照品、丹酚酸A对照品、丹酚酸B对照品制成对照品溶液，以梯度洗脱的方法记录色谱图进行高效液相色谱法鉴别；

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以甲醇:水:甲酸的体积比＝23:57:1为流动相B，按照下述方式进行梯度洗脱，流动相A与流动相B之比以体积百分比计，流速为每分钟1ml，柱温为30℃，检测波长为280nm，理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于5000；

0～20分钟，流动相A(％)：0～13，流动相B(％)：100～87

20～35分钟，流动相A(％)：13～21，流动相B(％)：87～79

35～60分钟：流动相A(％)：21～32，流动相B(％)：79～68

取本品0.5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，在功率为120W，频率为59KHZ的条件下超声处理15分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；

取丹参素对照品、丹酚酸A对照品、丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含丹参素20μg、丹酚酸A10μg、丹酚酸B100μg的溶液，即得对照品溶液；