[发明专利]血样中微量伊马替尼测定方法及在零期临床试验中的应用

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种药物的测定方法，特别涉及一种生物样品例如血浆中的药物的测定方法，更特别地涉及一种针对生物样品例如血浆中极微量的抗癌药物伊马替尼及其药用盐的测定方法。本发明还涉及该方法在药物零期临床试验研究中的应用。

背景技术

甲磺酸伊马替尼(Imatinib Mesylate)是瑞士诺华公司开发的一种选择性酪氨酸激酶抑制剂，属苯胺喹唑啉类化合物，其是针对P210蛋白的酪氨酸激酶活性的选择性抑制剂，靶向抑制Ph染色体阳性(Philadelphia chromosome positive，Ph+)慢性粒细胞白血病(Chronic Myeloid Leukaemia,CML)产生的具有酪氨酸激酶活性的异常蛋白Bcr-Abl。FDA已于2001年5月批准用于治疗慢性骨髓性白血病，2002年2月FDA进一步批准甲磺酸伊马替尼用于胃肠基质肿瘤的治疗。甲磺酸伊马替尼在体内外均可在细胞水平上抑制Bcr-Abl酪氨酸激酶，能选择性抑制Bcr-Abl阳性细胞系细胞、Ph染色体阳性的慢性粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病病人的新鲜细胞的增殖和诱导其凋亡。此外，甲磺酸伊马替尼还可抑制血小板衍化生长因子(PDGF)受体、干细胞因子(SCF)，c-Kit受体的酪氨酸激酶，从而抑制由PDGF和SCF介导的细胞行为。其化学名为：4-[(4-甲基-1-哌嗪)甲基]-N-[4-甲基-3-[[4-(3-吡啶)-2-嘧啶]氨基]苯基]-苯胺甲磺酸盐，分子式为C29H31N7O-CH4SO3，分子量为589.7。甲磺酸伊马替尼的化学结构如下所示：

甲磺酸伊马替尼为白色—类白色到浅褐色或浅黄色色调的结晶粉末。甲磺酸伊马替尼可溶于≤pH5.5的水性缓冲液中，而在中性到碱性的水性缓冲液中微溶到不溶。在非水溶剂中，甲磺酸伊马替尼自由溶解到极微溶于二甲亚砜、甲醇和乙醇，但是不溶于正辛醇、丙酮和乙腈。

甲磺酸伊马替尼在商业上可以商品名为的薄膜包衣片获得，它由Novartis Pharma Stein AG(Stein，Switzerland)制备，Novartis Pharmaceuticals Corporation(East Hanover,New Jersey)销售。片片包含的活性成分以伊马替尼游离碱计为100mg或400mg。

甲磺酸伊马替尼适用于治疗费城染色体阳性慢性髓细胞性白血病(CML)和Kit(CD 117)阳性不可切除 的和/或转移性恶性胃肠道间质瘤(GIST)。

通常给慢性相CML的成年患者处方400mg/天的剂量及给加速相或突发危象的成年患者处方600mg/天的剂量。另外为患有不可切除的和/或转移性恶性GIST的成年患者推荐400mg/天或600mg/天剂量的。通常口服给药，用饭和一大杯水服用，剂量为400mg或600mg，每天一次，及以400mg每天两次共给予800mg剂量。

关于零期临床试验的概念。传统的临床研究常由动物数据推测药物在人体进行临床试验的起始剂量，但人和动物间代谢酶种类及数量、代谢途径等均不同，药物在动物体内的吸收、分布、代谢及分泌与人体有很大差异，因此，这种简单的推断往往使临床试验，尤其对于创新药物的临床试验风险增加。2006年英国TNG1412造成的灾难性事件，为我们敲响了警钟。

零期临床试验是指活性化合物在完成临床前试验后未正式进入临床试验之前，研制者使用微剂量在少量健康志愿者或者病人(通常为6～15人)进行的药物试验，收集必要的有关药物安全及药代动力学的试验数据，以评估研发药物是否具有进一步开发为新药或生物制剂的可能性，是从临床前试验过渡到I期临床试验的中间环节。

进行零期临床试验的目的在于，通过对化合物或剂型进行研究，获得包含蛋白结合率、酶抑制率等的人体药动学数据和包含与靶点的结合情况相关的药效动力学数据，以及采用各种影像学研究手段获得的人体组织分布情况，以便早期从一组候选化合物中确定最有研发价值的先导化合物进行I期临床试验及后续的研发。另外。尽早了解先导化合物在人体的代谢特征。对于非临床安全性研究的动物选择、提高动物试验结果的预测价值也非常有意义。

关于零期临床试验的研究方法。零期临床试验的研究方法主要包括微剂量研究(micro-dose studies)和药理学相关剂量研究(pharmacologically relevant dose)。