[发明专利]一株野生中华竹鼠结肠微生物来源的乳酸杆菌及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一株野生中华竹鼠结肠微生物来源的乳酸杆菌及其应用。

背景技术

随着抗生素和化学合成抗菌药物的长期应用，其弊端也日益明显，如引起内源性感染和二重感染、耐药菌产生、动物机体免疫力下降以及药物残留等，这使得微生态制剂的发展应用成为必然。微生态制剂天然、无毒副作用、安全可靠、不污染环境应用范围十分广泛。乳酸杆菌（Lactobacillus ）便是其中主要的一种，对动物无任何不良反应，可以产生乳酸菌素活性物质，通过生物拮抗、改善动物肠道的生态环境及提高动物免疫力等机制发挥其作用。乳酸菌在自然界中分布广泛，能够定植在人和畜禽的体表、肠道黏膜、呼吸道、生殖道等部位（云月英,王文龙. 乳酸菌与健康[J].农产品加工, 2009, （1）:67-68）。加之绝大多数乳酸菌自身无毒无害，在人和动植物体内存在的能够起到良好的益生效果，与机体健康有密切关系，因此乳酸菌早已被人们称作益生菌(刘艳姿.乳酸菌的生理功能特性及应用的研究[D].燕山大学, 2007)。

动物生产中常使用抗生素有助于提高畜禽抵御疾病的能力，虽然能够很好地提高生产性能，增加养殖效益，但是抗生素的弊端也日益凸显：畜禽体内许多病原菌产生了耐药性；动物体内发生内源性或者二重感染；很多抗生素在畜禽体内药物半衰期很长，造成畜禽抗生素残留。近年来，寻求一种毒副作用小、药物残留少、耐药性低又能促进动物生长的免疫能力的微生物制剂来替代抗生素已成为研究热点。通过饲喂微生态制剂可以促进肠道内的益生菌的生长，同时产生的代谢产物也能抑制有害微生物的繁殖，从而改善畜禽体内菌群结构，增加机体免疫力。这种方式自身对畜禽机体无病原性和残留问题，对其他微生物也没有产生耐药的影响。乳酸菌作为微生态制剂在饲料中添加，已经成为重要的抗生素替代品(姜洪起, 李鹏.饲用抗生素替代品的研究进展[J]饲料研究，2011,2:25-27)。所以乳酸菌对实现畜牧业健康和可持续发展方面具有广阔的应用前景。

发明内容

本发明的目的在于提供一株野生中华竹鼠结肠微生物来源的乳酸杆菌，并将其作为益生菌用于畜牧业生产中。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

本发明所提供的野生中华竹鼠结肠微生物来源的乳酸杆菌，该菌株为乳杆菌（Lactobacillus sp.）P1，已于2014年10月22日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心登记保藏，保藏编号为CGMCC No.9832。

本发明还提供了所述乳酸杆菌在制备饲料添加剂中的应用，即将活菌株作为益生菌用于畜牧业生产中。

本发明的优点和积极效果：

本发明的优点在于从野生竹鼠盲肠获得一株乳酸杆菌，经口腔灌服番鸭后，可提高番鸭日增重和血液免疫球蛋白含量，从而提高番鸭免疫力和生产性能，节约养殖成本。将本发明的乳酸杆菌用于畜牧业生产中，能预防家畜胃肠道疾病，提高家畜机体免疫力，提高家畜饲料转化率和生产性能。

附图说明

图1 是明串珠乳酸杆菌革兰氏染色形态学鉴定；

图2 是16srDNA序列扩增示意图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此。

一株竹鼠结肠微生物来源的乳酸杆菌，菌种命名为P1，分类命名：乳杆菌（Lactobacillus sp.），其保藏编号：CGMCC No. 9832，保藏日期：2014年10月22日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

实施例1：竹鼠盲肠乳酸杆菌筛选及鉴定

筛选用野生中华竹鼠捕获于福建闽清县金沙镇。样品处理过程为：解剖竹鼠获取盲肠内容物，保存于无菌离心管中。配制MRS培养基：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母提取物5g，柠檬酸三氨2g，吐温-80 1mL，醋酸钠5g，葡萄糖20g，l磷酸氢二钾2g，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.25g，蒸馏水1000mL，调pH值6.2-6.4，固体培养基加入15g琼脂，20g无水碳酸钙，120℃高压灭菌20min后备用。

将获取的竹鼠盲肠内容物，用生理盐水进行梯度稀释，分别吸取50μL 10^-6、10^-7和10^-8倍菌液均匀涂布于含有2% CaCO₃的MRS固体培养基上，厌氧培养48 h后挑取有溶钙圈的菌落进行纯化培养。