[发明专利]硫酸酯化绞股蓝多糖的制备方法

权利要求书

1.一种硫酸酯化绞股蓝多糖的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

步骤一、在大容器内用95％乙醇浸泡绞股蓝干植物，之后除去乙醇，在旋转蒸发仪上用95％乙醇50℃回流提取2次，每次2h，提取结束后过滤，挥干乙醇，得到的干燥物加超纯水，在大的双口烧瓶中95℃回流提取3次，每次3-4小时，结束后用双层纱布过滤，收集滤液，50℃减压浓缩，20℃，7000rpm，离心30min后，取上清液，加入4倍体积95％乙醇，4℃沉淀过夜，收集沉淀，离心；沉淀分别用95％乙醇、丙酮、乙醚洗涤，最后冷冻干燥，得到绞股蓝粗多糖粉末；

步骤二、将0.5％的绞股蓝粗多糖水溶液用30％浓氨水调节pH值至8.0，在搅拌下,于50℃逐渐加入30％H₂O₂，至溶液为淡黄色，恒温保持2h，用CH₃COOH调节pH值至7.0，减压浓缩；加入4倍上清体积的95％乙醇，4℃过夜，7000rpm，15min离心，收集沉淀，依次用95％乙醇、丙酮、乙醚洗涤，冷冻干燥；得到精制绞股蓝多糖；

步骤三、用N,N-二甲基甲酰胺作溶剂，溶解三氧化硫-吡啶复合物，按照2.5g三氧化硫-吡啶/20mL的N,N-二甲基甲酰胺的量加入；之后将精制多糖加入到复合物体系中，用溶剂洗涤烧杯，搅拌溶解后，将体系移入带有温度计和搅拌装置的三颈瓶中，持续搅拌，60℃水浴反应；反应结束后冷却至室温，用5％NaOH调PH到7.0，3倍体积的乙醇4℃沉淀过夜，次日7500rpm，15min离心，蒸馏水透析120h，透析袋截留分子量为3500，冷冻干燥，得到不同取代度的硫酸酯化绞股蓝多糖。