[发明专利]脂蛋白(a)定量测定试剂盒及其使用方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及医学检测和诊断领域。具体地说，本发明涉及定量测定人血清 或血浆中脂蛋白(a)的试剂盒以及所述试剂盒的使用方法和应用。

背景技术

脂蛋白(a)(Lp(a))是人血浆中的一类特别的脂蛋白颗粒，最早由Berg于1963年发现，主要由低密度脂蛋白颗粒和富含糖链的高度亲水的apo(a)组成；其中每个apo(a)分子通过一个二硫键和一分子的apoB-100共价交联。Apo(a)由三个完全不同的结构组成：未激活的蛋白酶区域、一个拷贝的K5环饼和多拷贝的K4环饼区。

研究表明，人血浆中Lp(a)浓度的升高与心血管功能的紊乱及脑血管疾病相 关，血浆中Lp(a)浓度的升高通常预示着早期的冠状动脉和梗阻风险的增加，同 时由于Lp(a)基本浓度具有高度的遗传性，因此，Lp(a)是早期冠心病(CHD)的重 要预示因子，对其进行检测对于心血管疾病的预测具有重要意义。

目前，已知的检测脂蛋白(a)浓度的方法有酶联免疫法、放射免疫法、荧光 免疫测定法等检测方法，但上述测定方法的操作比较复杂，检测用时长，过度 浪费资源的缺点，不适合做常规检测。例如，CN103149370A公开了一种脂蛋 白(a)定量测定试剂盒，该试剂盒利用脂蛋白(a)的多克隆抗体包被乳胶颗粒并且 在试剂R2中利用阿斯巴甜减轻血清中类风湿因子对于检测的干扰，但该试剂盒 以及目前市场上的脂蛋白(a)定量测定试剂盒大都采用脂蛋白(a)多克隆抗体； CN102749459A公开了一种脂蛋白(a)的检测试剂盒，其利用结合有脂蛋白(a)单 克隆抗体的乳胶颗粒；CN103604930A公开了一种脂蛋白(a)的检测试剂盒，其 利用脂蛋白(a)单抗乳胶微球，能够解决与纤溶酶原有交叉反应以及类风湿因子 对于检测的干扰的问题；CN103454193A公开了利用包被有脂蛋白(a)单克隆抗 体的乳胶悬液的脂蛋白(a)的检测试剂盒。但这些申请均并公开采用的是何种单 克隆抗体，而且这些试剂盒无法同时确保高灵敏度和低值区域的重复性。

因此，本领域急需稳定性好、检测方便、同时具备高灵敏度和低值区域重 复性的脂蛋白(a)定量测定试剂盒。

发明内容

本发明的目的在于提供一种人脂蛋白(a)的单克隆抗体标记的颗粒，以及包 含所述颗粒的检测试剂盒，所述人脂蛋白(a)的单克隆抗体标记的颗粒以及检测 试剂盒的稳定性好、检测方便、同时具备高灵敏度和低值区域重复性。

在第一方面，本发明提供一种鼠抗人脂蛋白(a)单克隆抗体标记的颗粒，所述 鼠抗人脂蛋白(a)单克隆抗体是美国ABGENT公司生产的单克隆抗体(克隆号为 AO1237a)。

在优选的实施方式中，所述鼠抗人脂蛋白(a)单克隆抗体标记的颗粒在37℃保 存3天后，定标稳定性良好。在具体的实施方式中，本发明的鼠抗人脂蛋白(a) 单克隆抗体标记的颗粒在37℃保存3天后，测试20mg/L样本的吸光度差值(ΔA) ≥0.04A。

在第二方面，本发明提供一种鼠抗人脂蛋白(a)单克隆抗体标记的颗粒的组 合，所述鼠抗人脂蛋白(a)单克隆抗体是美国ABGENT公司生产的单克隆抗体(克 隆号为AO1237a)；并且所述颗粒是具有不同粒径的两种或多种颗粒。

在优选的实施方式中，所述颗粒包括但不限于乳胶颗粒、磁珠；优选乳胶 颗粒；更优选表面带羧基的聚苯乙烯胶乳颗粒。

在优选的实施方式中，所述颗粒的粒径选自60-300nm。

在优选的实施方式中，所述颗粒是具有不同粒径的两种颗粒。

在优选的实施方式中，所述颗粒的粒径分别选自60-150nm和150-280nm。

在优选的实施方式中，所述颗粒的粒径分别是105nm和200nm。

在优选的实施方式中，所述具有不同粒径的两种颗粒的比例为40:60–60:40。

在优选的实施方式中，所述具有不同粒径的两种颗粒的比例为50:50。

在第三方面，本发明提供一种脂蛋白(a)定量测定试剂盒，所述试剂盒包含：

(1)样品预处理剂；

(2)检测剂；和

(3)任选的校准品；

其中，所述检测剂包含本发明第一方面所述的鼠抗人脂蛋白(a)单克隆抗体标 记的颗粒，或本发明第二方面所述的鼠抗人脂蛋白(a)单克隆抗体标记的颗粒的组 合。