[发明专利]一种水土环境安全微生态制剂及其制备方法

说明书

一、技术领域：

本发明属于现代农业微生物技术领域，具体涉及一种水土环境安全微生态制剂及其制备方法。

二、背景技术：

背景技术中，水是生命之源,土是生存之本,水土是人类赖以生存和发展的基本条件,是不可替代的基础资源。而重金属对水土环境的污染,加剧了灾害的发生,极大地破坏了生态环境,给水土环境资源带来不可逆转的损失。水土污染安全已成为我国的重大环境问题。随着水土破坏日益严重，将会给我们造成重大的灾难。比如生态失调，重金属污染超标，破坏了土地、植被等生态系统要素，导致生态失调，进而导致旱涝灾害频繁发生；比如土地资源的破坏，会严重的威胁到人类的生存条件。为了让这不可逆转的损失降到尽可能低的限度，我们需要创新一种新型的水土环境安全微生态制剂的制备方法，在核心技术上突出表现为可以智能性调控微生态制剂制备的温度和驯化适性能力，从而最大限度的保证其生物活性及抗逆性，使水土环境安全微生态制剂的制备实现规范性.高效性、安全性，并且操作简便，大大降低技术成本和提高实用性能。

三、发明内容：

本发明为了解决上述背景技术中的不足之处，提供一种水土环境安全微生态制剂的制备方法，其能有效的提高水土环境安全微生态制剂生产效率，且最大限度的保证其活性，提升了水土环境安全微生态制剂生产的规模化、工业化发展。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为 ：一种水土环境安全微生态制剂，其特征在于：所述制剂由以下重量份原料组成：枯草芽孢杆菌65-80 份，蜡样芽胞杆菌50-120 份，乳酸菌60-95份，酵母菌40-100份。

所述的一种水土环境安全微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述的步骤为：

1）将枯草芽孢杆菌进行培养，使用的培养基为0.5%的蔗糖，0.02 %的MgSO₄，0.5%的CaCO₃，0.02%的K₂HPO₄， 在pH为7.0 ?7.3，培养温度为28—38°C，培养时间为32h-48h,的条件下进行培养，得到枯草芽孢杆菌种Ⅰ；

2）将枯草芽孢杆菌种Ⅰ培养,培养过程为:在容积为500ml的三角瓶中装入100ml枯草芽孢杆菌种，再高温122°C下灭菌25min，冷却后接斜面一环，摇床培养，摇床转速为250转/min，培养温度37.2°C，培养时间18-30h，得到枯草芽孢杆菌种Ⅱ；

3)将枯草芽孢杆菌种Ⅱ进行发酵，发酵条件为:在容积为1吨的罐中装800L枯草芽孢杆菌种Ⅱ，在温度为28—38°C，搅拌速度为150-280转/min，通气量1-3立方/min的条件下发酵培养13-32h，发酵结束时枯草芽孢杆菌的含量为8 X 10¹¹—8X 10¹²个/ML菌液，结束后，菌液通过高速冷冻离心机用去离子无菌水洗涤三次，离心收集细胞，加保护剂，真空冷冻干燥，即得枯草芽孢杆菌粉末；

4）将枯草芽孢杆菌粉末吸附在纳米二氧化硅中，干燥后与蜡样芽胞杆菌、乳酸菌、酵母菌按照重量比为1:1.3:1.5:1.25的比例混合，得到水土环境安全微生态制剂。

所述的高速冷冻离心机的转速为7000转/分，时间为20min，温度为4℃。

所述的保护剂为海藻糖。

与现有技术相比，本发明具有的优点和效果如下：本发明能智能性调控微生态制剂制备的温度和驯化适性能力，最大限度的保证其生物活性、抗逆性，有效提高生产效率，使生产规模化、工业化。

四、具体实施方式：

实施例一：

一种水土环境安全微生态制剂由以下重量份原料组成：枯草芽孢杆菌65 份，蜡样芽胞杆菌50 份，乳酸菌60份，酵母菌40份。

一种水土环境安全微生态制剂的制备方法的步骤为：

1）将枯草芽孢杆菌进行培养，使用的培养基为0.5%的蔗糖，0.02 %的MgSO₄，0.5%的CaCO₃，0.02%的K₂HPO₄，（质量百分比） 在pH为7.0 ?7.3，培养温度为28—38°C，培养时间为32h-48h,的条件下进行培养，得到枯草芽孢杆菌种Ⅰ；

2）将枯草芽孢杆菌种Ⅰ培养,培养过程为:在容积为500ml的三角瓶中装入100ml枯草芽孢杆菌种，再高温122°C下灭菌25min，冷却后接斜面一环，摇床培养，摇床转速为250转/min，培养温度37.2°C，培养时间18-30h，得到枯草芽孢杆菌种Ⅱ；