[发明专利]一种水土环境安全微生态制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种水土环境安全微生态制剂，其特征在于：所述制剂由以下重量份原料组成：枯草芽孢杆菌65-80 份，蜡样芽胞杆菌50-120 份，乳酸菌60-95份，酵母菌40-100份。

2.根据权利要求1所述的一种水土环境安全微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述的步骤为：

1）将枯草芽孢杆菌进行培养，使用的培养基为0.5%的蔗糖，0.02 %的MgSO₄，0.5%的CaCO₃，0.02%的K₂HPO₄， 在pH为7.0 ?7.3，培养温度为28—38°C，培养时间为32h-48h,的条件下进行培养，得到枯草芽孢杆菌种Ⅰ；

2）将枯草芽孢杆菌种Ⅰ培养,培养过程为:在容积为500ml的三角瓶中装入100ml枯草芽孢杆菌种，再高温122°C下灭菌25min，冷却后接斜面一环，摇床培养，摇床转速为250转/min，培养温度37.2°C，培养时间18-30h，得到枯草芽孢杆菌种Ⅱ；

3)将枯草芽孢杆菌种Ⅱ进行发酵，发酵条件为:在容积为1吨的罐中装800L枯草芽孢杆菌种Ⅱ，在温度为28—38°C，搅拌速度为150-280转/min，通气量1-3立方/min的条件下发酵培养13-32h，发酵结束时枯草芽孢杆菌的含量为8 X 10¹¹—8X 10¹²个/ML菌液，结束后，菌液通过高速冷冻离心机用去离子无菌水洗涤三次，离心收集细胞，加保护剂，真空冷冻干燥，即得枯草芽孢杆菌粉末；

4）将枯草芽孢杆菌粉末吸附在纳米二氧化硅中，干燥后与蜡样芽胞杆菌、乳酸菌、酵母菌按照重量比为1:1.3:1.5:1.25的比例混合，得到水土环境安全微生态制剂。

3.根据权利要求2所述的一种水土环境安全微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述的高速冷冻离心机的转速为7000转/分，时间为20min，温度为4℃。

4.根据权利要求2所述的一种水土环境安全微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述的保护剂为海藻糖。