[发明专利]一种用液相色谱法分离测定奥拉西坦及其中间体的方法

说明书

本发明属分析化学领域，本发明公开了一种用液相色谱法分离测定奥拉西坦及其中间体的方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的离子对试剂‑有机相为流动相，可以定量测定奥拉西坦各中间体的含量，从而有效控制奥拉西坦的质量。本发明方法专属性强，准确度高，操作简便。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及液相色谱法分离测定奥拉西坦及其中间体含量的方法。

背景技术

奥拉西坦是一种促进学习，增强记忆力的新型中枢神经系统药物，该活性成分是一种合成的羟基氨基丁酸(BABOB)环状衍生物，有激活、保护或促进神经细胞的功能恢复，改善智能障碍患者的记忆和学习的功能。而药物本身没有直接的血管活性，也没有中枢兴奋作用，对学习记忆能力的影响是一种持久的促进作用。奥拉西坦，化学名为2-(4-羟基吡咯烷-2-酮-1-基)乙酰胺，英文通用名为Oxiracetam。分子式为C₆H₁₀N₂O₃。奥拉西坦结构式为：

。

在该化合物的生产过程中，有几个中间体可能会由于去除不完全而影响药物的纯度和质量，对于奥拉西坦的生产质量主要控制的中间体有4个，分别是氯乙酸甲酯（ICT-01）、S（-）-4-氯-3-羟基丁酸乙酯（ICT-02）、2-氨基乙酰胺（ICT-1）、4-羟基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸乙酯（ICT-ZD），结构式分别为：

。

对于奥拉西坦生产过程中引入的中间体，在原料药中是需要进行质量控制的，因此，实现奥拉西坦及其中间体的分离，对奥拉西坦的质量控制具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分析奥拉西坦纯度以及分离其中间体的方法，从而实现奥拉西坦与其中间体的分离和测定，从而保证奥拉西坦的纯度，实现其终产品原料药的质量控制。

本发明所述的用液相色谱法分析奥拉西坦纯度以及分离其中间体的方法，是采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的离子对试剂溶液-有机相为流动相。

上述所说的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，色谱柱品牌选自Apollo或者Kromasil。

上述所说的有机相选自以下化合物：甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇、四氢呋喃等，优选为甲醇。

上述所说的方法，其流动相离子对试剂溶液-有机相采用等度洗脱。

上述所说的方法中，离子对选自庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠、戊烷磺酸钠，优选为庚烷磺酸钠。

上述所说的方法中，其中离子对溶液中包含的离子对的浓度为0.01M～0.1M，优选浓度为0.01M。

上述所说的方法中，离子对试剂溶液的pH为2.8，用稀磷酸调节pH值。

本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现：

（1）取奥拉西坦样品适量，用0.01M庚烷磺酸钠溶液：甲醇=90:10溶解样品，配制成每1mL含奥拉西坦0.1～1.5mg的样品溶液。

（2）设置流动相流速为0.5～1.5mL/min，流动相流速优选1.0mL/min，检测波长为205～250nm，最佳检测波长优选205nm，柱温箱温度为15～40℃，柱温箱温度优选20℃。

（3）取（1）的样品溶液5～50μL，注入液相色谱仪，完成奥拉西坦与其中间体的分离测定。其中：

高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津：LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-10ASvp