[发明专利]一种菜豆直接再生体系的建立方法

权利要求书

1.一种菜豆直接再生体系的建立方法，其特征在于按如下的步骤进行：

（1）菜豆无菌苗的获得：

挑选籽粒均匀、饱满的菜豆种子，置于玻璃容器内，将浓度为10%-30%的次氯酸钠溶液缓缓倒入容器内，使菜豆种子完全浸泡在次氯酸钠溶液中，整个消毒过程用时10-20min，并每隔1-2min搅拌一次，使种子表面与溶液充分接触，以保证消毒彻底，消毒后的菜豆种子用无菌水清洗4-5次，整个消毒过程在超净工作台内完成；将清洗后的菜豆种子插入萌发培养基内，种子插入一半即可，种子萌发环境为温度20℃-25℃，光周期为16h/8h光照/黑暗；

（2）直接再生培养基配方及操作方法：

将萌发5-6天的菜豆无菌苗在超净工作台中取出，放在灭菌后的培养皿里，切除顶端生长点及胚根，留下子叶节上下各1.5-3.5mm的下胚轴，顺着下胚轴将外植体纵向平均分开，得到两个对称的带子叶的子叶节，用刀片对纵切面进行划伤，伤口长3-4mm，深度0.3-0.5mm；将处理好的外植体近轴面向上与培养基成45度角斜插入芽诱导培养基中，密封并置于培养室中培养，培养环境为温度20℃-25℃，光周期为16h/8h光照/黑暗；培养基每隔5-10天更换一次，15-20天后可获得再生植株；所述的芽诱导培养基指的是：MSB₅+ 6-BA 1.0-6.0 mg/L+IAA 0.1-1.0 mg/L+活性炭10-50mg/L；

（3）再生芽的生根培养基配方及操作方法：将长到4-5cm的不定芽延基部从外植体上切下，插入1/2MSB₅+ IBA 0.1-1.0 mg/L+活性炭5-30mg/L生根培养基内，密封好后置于培养室内培养，培养环境为温度20-25℃，光周期为16h/8h光照/黑暗，7-10天顺利生根；

（4）组培苗的移栽方法：生根后的组培苗，在培养室内开盖炼苗3-5天，然后移栽到装有基质的营养钵内，将移栽好的组培苗放在塑料拱棚内生长，保证拱棚内的温度25-28℃，相对湿度60%，拱棚内生长5天逐渐给拱棚放风，直至幼苗适应温室环境，再将拱棚撤去；

（5）成活的组培苗便可移栽入露地进行正常管理。

2.权利要求1所述的菜豆直接再生体系的建立方法，其中的菜豆品种指的是双丰3号。

3.权利要求所述菜豆直接再生体系的建立方法在提高菜豆生芽率、生根率、植株成苗率方面的应用。