[发明专利]一种油棕叶片总蛋白质的专用提取液及提取方法

说明书

本发明涉及蛋白质组学研究领域，公开了一种油棕叶片总蛋白质的专用提取液及提取方法。在研磨成粉末的油棕叶片中添加本发明所述的油棕专用提取液，进行油棕叶片的总蛋白质提取，经过定量测定，提取得到的上清液量、蛋白质浓度均有明显增加。每2g油棕叶片，可得3mg以上的总蛋白质；提取得到的蛋白质溶液颜色澄清，没有或只有极少粘稠，纯度大大提高，极大的方便后续研究的进行。

技术领域

本发明涉及蛋白质组学研究领域，特别是指一种油棕叶片总蛋白质的专用提取液及提取方法。

背景技术

在蛋白质组学的研究中，植物中蛋白质的提取是所有研究的基础，也直接影响后续实验的结果。目前，植物蛋白质的提取中常用的方法有三氯乙酸-丙酮沉淀(TCA)法、E-TCA法和酚(Phe)抽法。以上方法虽然可以从不同方面除去植物组织中的多糖、酯类和酚类等干扰蛋白质分析结果的杂质，但是在热带作物蛋白质的提取效果并不理想。中国发明专利CN1908007A公开了一种植物总蛋白的提取方法及其专用提取液，提出了一种植物总蛋白的提取方法，适用于大部分植物，尤其是盐生植物中总蛋白质的提取。由于提取过程中所需三种重要的化学成分四硼酸钠(Borax)、聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP)和酚(Phenol),所以命名为BPP法。运用BPP法提取热带作物，如椰子、槟榔、香蕉、橡胶，木著等植物叶片总蛋白质的提取，也取得了较好的效果。

油棕(Elaeis guineensis)属多年生单子叶植物，油棕的果肉、果仁中含油丰富，在各种油料作物中，有“世界油王”之称。利用BPP法提取其叶片总蛋白，提取过程中上清液较为粘稠，用移液器吸取上清液极为困难，造成油棕叶片提取效率降低，总蛋白纯度不高，严重影响了后续实验的进行。这种现象在夏天气温较高是尤为严重，往往导致总蛋白提取失败。

发明内容

本发明提出了一种油棕叶片总蛋白质的专用提取液及提取方法，可有效除去上清液中的粘稠物质，提高总蛋白提取产率和纯度。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种油棕叶片总蛋白质的专用提取液，以所述油棕叶片总蛋白质专用提取液的总体积记，包括以下质量浓度的组份：络合剂35-40g/L，四硼酸钠15-20g/L，还原剂20-40g/L，蔗糖200-400g/L；所述油棕总蛋白质的专用提取液PH值为4-7。

进一步，所述络合剂为ENTA或EDTA-2Na。

进一步，所述还原剂为维生素C和β-巯基乙醇的混合物。

进一步，维生素C的质量浓度为5-10g/L，β-巯基乙醇的质量浓度为15-28g/L。

进一步，所述油棕叶片总蛋白质的专用提取液PH值为4-5。

进一步，所述PH值调节所用的试剂为盐酸。

一种油棕叶片总蛋白质的提取方法，包括以下步骤：油棕叶片研磨成粉末后，加入所述油棕叶片总蛋白质专用提取液，室温漩涡震荡4-6min，离心后去掉上清液，然后按照BPP法进行总蛋白质的提取。

进一步，以叶片质量记，所述油棕叶片总蛋白质专用提取液加入的量为4-6(V/W)倍量。

进一步，所述离心过程中，温度为3-5℃、离心力10000-17000RCF，离心时间为8-12min。

本发明的有益效果：