[发明专利]一种具有毒杀线虫活性的化合物及其制备方法

说明书

本发明涉及一种具有毒杀线虫活性的化合物，属于微生物与生物农药技术领域。该化合物为4‑氧杂二环[3.2.2]壬‑1(7),5,8‑三烯，其制备方法为将SMrs28菌株用液体培养基常规发酵培养，发酵液经过滤后，将滤液过D101型大孔树酯，得到的洗脱液低压浓缩后，经反复硅胶和羟丙基葡聚糖凝胶层析分离。本发明所述化合物在液体浸泡法的抗线虫活性试验中显示出毒杀线虫的活性，具有对环境无污染、成本低、毒杀线虫效果佳的优点。

技术领域

本发明涉及一种具有毒杀线虫活性的化合物及其制备方法，属于微生物与生物农药技术领域。

背景技术

植物寄生线虫是一类非常重要的植物病害，据报道植物寄生线虫每年在全世界范围内造成高达约1500亿美元的农业损失 (Abad et al. 2008)。马铃薯腐烂茎线虫是对农业危害最重要的线虫之一，主要分布在许多国家的温带区域，能使马铃薯的产量造成巨大的损失。在我国，马铃薯腐烂茎线虫（Ditylenchus Destructor）是制约我国甘薯生产的三大病害之一，一般发病田减产20% - 50%，重病田甚至绝产无收。松材线虫（Bursaphelenchusxylophilus）病是世界上最具危险性的森林病害之一，属国际重要检疫对象，列为森林病害之首，被称为“无烟的森林之火”。据Hajime et al (2001)报道，松材线虫每年在全球造成约10亿美元的经济损失。该病自1934年被报道以来，现已广泛分布于日本、美国、韩国、加拿大和中国等。在我国，该病害已在多省区分布并扩散蔓延，给我国森林资源及生态环境造成严重破坏。

目前对线虫的防治主要以化学防治为主，但由于化学杀线虫剂多数是高毒、高残留农药，对非目标生物和环境造成严重威胁。随着人们环境意识的逐步增强，化学药剂的应用渐渐受到限制，因此人们力求从自然界中寻找能防治植物病原线虫的天然药剂。微生物是产生活性天然产物的主要来源之一，从微生物的代谢物中寻找具有线虫毒杀活性的天然产物成为一个研究热点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有毒杀线虫活性的化合物及其制备方法。

本发明对采自甘肃萃英山瑞香狼毒根际土壤中的芽孢杆菌（Bacillus sp.）SMrs28进行了活性代谢物化学成分的研究，从中分离到了一个结构新颖的化合物4-氧杂二环[3.2.2]壬-1(7),5,8-三烯（4-oxabicyclo[3.2.2]nona-1(7),5,8-triene），经国内外文献检索，目前未见天然来源及有关活性的报道，也未见其被用于制备杀线虫制剂应用的公开报道。

本发明的生产菌株为芽孢杆菌（Bacillus sp.）SMrs28，该菌株SMrs28已于2011年10月18日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No. 5352。

本发明所提供的菌株SMrs28属于芽孢杆菌属（Bacillus），其菌落白色，光滑湿润，具有光泽，革兰氏阳性菌，细胞长杆状，单生，芽孢卵圆形，端生，膨大。

本发明将SMrs28菌株用液体培养基常规发酵培养，发酵液经过滤后，将滤液过D101型大孔树酯，得到的洗脱液低压浓缩后，经反复硅胶（石油醚/丙酮，氯仿/乙酸乙酯）和羟丙基葡聚糖凝胶（Sephadex LH-20）（氯仿/甲醇）层析，得到4-氧杂二环[3.2.2]壬-1(7),5,8-三烯，该化合物的结构式为：

。

其理化性质：

外观：无色针状晶体；

溶解性：溶于氯仿、丙酮、甲醇、二甲亚砜等；不溶于石油醚和水等；