[发明专利]蓝靛果忍冬器官型再生培养方法

说明书

技术领域：本发明涉及一种蓝靛果忍冬器官型再生培养方法。

背景技术

蓝靛果忍冬(Lonicera caerulea)是忍冬科(Caprifoliaceae)忍冬属落叶灌木，高1.3～1.5m，主要分布在俄罗斯、中国、日本和北美。北日勒(Берель)是西伯利亚科学院理萨文科园艺研究所1980年从阿尔泰忍冬与勘察加忍冬的蓝鸟、蓝色纺锤、蔚蓝等品种的杂交种中选出的新品种，1996年被列入俄罗斯国家登记册。果实为小浆果，平均单果重1.3～1.6g，果汁多，味酸甜，含糖7.2％、酸2.8％，每100g鲜果含维生素C 23mg，维生素P 1263mg，果实较硬，耐贮运，是可综合利用的品种。果实适合鲜食以及用来加工成果汁、果酒、饮料等，也是加工天然食用色素的极好原料，具有很高的营养价值和保健功能，国际公认为是继越桔、黑穗醋栗、树莓和沙棘之后的又一新兴小浆果树种。蓝靛果忍冬中存在丰富的生理活性物质，对于治疗目前人类的许多常见疾病都有重大价值，因此，在食品和医疗保健品的开发上都具有重要的经济意义。

近年来，随着市场需求的不断增长，鲜果价格不断提高，加之对 蓝靛果饮料、果酒等产品的开发，导致其野生资源锐减，市场供不应求。我国从20世纪80年代开展了野生蓝靛果的驯化栽培试验以及开发利用工作，但新品种选育及定量化的培育试验工作才刚刚开始，因此开展优良品种组织培养技术研究尤为重要。

国内外关于蓝靛果忍冬组织培养与快速繁殖的报道很少，现有报道中对俄罗斯引进品种组织培养与植株再生的研究也是通过愈伤组织的器官发生型途径，尚没有不经过愈伤组织，直接从外植体上再生不定芽，缩短组织培养周期的相关报道。现有的蓝靛果忍冬组织培养方法，培养周期长，本发明采用器官型再生培养方法，与现有的由外植体诱导愈伤组织，通过愈伤组织再分化不定芽的器官发生型培养方法相比，减少了由外植体诱导愈伤组织的过程，直接从外植体上再生不定芽，缩短了组织培养的培养周期，节约了组织培养成本，加快了繁殖途径，并且形成的不定芽保持了原品种的优良特性。

发明内容：本发明的目的是提供一种蓝靛果忍冬器官型再生培养方法，改变现有蓝靛果忍冬组织培养由外植体诱导愈伤组织，通过愈伤组织再分化不定芽的器官发生型的培养方法，简化现有蓝靛果忍冬组织培养的环节，缩短培养周期，节约培养成本。本发明的技术方案为：

一种蓝靛果忍冬器官型再生培养方法，其特征是：由以下四个步 骤组成：

第一步、外植体灭菌

蓝靛果忍冬外植体接种至器官型再生培养基之前，外植体采集在6月初进行，外植体应选用定植后一年生或两年生植株新梢的茎尖或茎段，将采集的外植体放入清水中浸泡，加入少量洗衣粉浸泡搅拌2～3min，然后放入流水冲洗4～6h，于超净工作台上用体积百分比浓度为75％的酒精浸泡30s，无菌水冲洗3次，再用质量百分比浓度为0.1％的氯化汞溶液消毒8～10min，然后用无菌水冲洗6～7次，再接种于器官型再生培养基上；

第二步、基本培养基