[发明专利]一种制备阿肽地尔的方法

说明书

技术领域

本发明属于多肽药物制备方法技术领域，特别涉及一种制备阿肽地尔的方法。

背景技术

阿肽地尔，英名为：Aviptadil。

所述阿肽地尔的肽序如下：

H-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Ser-Ile-Leu-Asn-NH₂

阿肽地尔为Mondobiotech AG和Biogen Idec公司开发出来，是由28个氨基酸组成的线性肽。主要用于急性呼吸窘迫综合症和特发性肺纤维化治疗，其效果较好且副作用小，是一种很有市场前景的多肽药物。

目前阿肽地尔常规合成方法为逐个偶联方法，合成效率低下，偶联组氨酸容易消旋；另外CN201310100852.3报道了采用Boc-His(3-Bum)-Ser(Psi(Me,Me)pro)-OH假二肽片段法偶联，虽然可以一定程度上减少组氨酸消旋，提高纯度和收率，但是此假二肽价格昂贵，不适合大规模生产。

综上所述，目前阿肽地尔的制备的不足有：合成效率低下，降低组氨酸消旋的成本高，不适合大规模生产。

发明内容

本发明为解决上述技术问题从而提供一种制备阿肽地尔的方法，该方法使用Fmoc-Leu-Asn-OH二肽片段偶联23、24位和27、28位氨基酸，而第1位组氨酸偶联采用Boc-His(Trt)-OH。本发明提供了一种合成效率高、成本低、同时还能避免消旋杂质D-His¹-阿肽地尔，适合规模化生产的阿肽地尔的合成工艺。

本发明的合成路线如图1所示：首先通过液相法合成二肽片段Fmoc-Leu-Asn-OH；然后采用固相合成法，以Rink Amide MBHA氨基树脂为起始树脂，按照阿肽地尔主链肽序依次偶联具有N端Fmoc保护且侧链保护的氨基酸，其中23、24位和27、28位氨基酸偶联采用二肽片段Fmoc-Leu-Asn-OH偶联，而第1位组氨酸偶联采用Boc-His(Trt)-OH；最后肽树脂裂解，纯化，冻干后得到阿肽地尔。

本发明中一些常用的缩写具有以下含义；

Fmoc ：芴甲氧羰基

Fmoc-AA ：芴甲氧羰基保护的氨基酸

DIC ：N，N′-二异丙基碳化二亚胺

PyBOP ：六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷

HATU ：2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯

HOBt ：1-羟基苯骈三唑

tBu ：叔丁基

Trt ：三苯甲基

Boc ：叔丁氧羰基

Pbf ：2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基

Ile ：异亮氨酸

Ser ：丝氨酸

Tyr ：酪氨酸

Lys ：赖氨酸

Val ：缬氨酸

Ala ：丙氨酸

Met ：甲硫氨酸

Gln ：谷氨酰胺

Arg ：精氨酸

Leu ：亮氨酸

Thr ：苏氨酸

Asn ：天冬酰胺

Asp ：天冬氨酸

Phe ：苯丙氨酸

His ：组氨酸

DMF ：N,N′-二甲基甲酰胺

MeOH ：甲醇

DCM ：二氯甲烷

TFE ：三氟乙醇

NMP ：N-甲基吡咯烷酮

DMSO ：二甲基亚砜

TFA ：三氟醋酸

PhSMe ：苯甲硫醚

EDT ：1,2-乙二硫醇

Piperidine ：六氢吡啶

为此本发明提供一种制备阿肽地尔的方法，其步骤如下：

步骤1，通过液相法合成二肽片段Fmoc-Leu-Asn-OH；

步骤2，采用固相合成法，以Rink Amide MBHA氨基树脂为起始树脂，按照阿肽地尔主链肽序依次偶联具有N端Fmoc保护且侧链保护的氨基酸，其中23、24位和27、28位氨基酸偶联采用二肽片段Fmoc-Leu-Asn-OH偶联，而第1位氨基酸采用Boc-His(Trt)-OH；

步骤3，肽树脂裂解，纯化，冻干后得到阿肽地尔。