[发明专利]一种东方百合的繁殖方法

权利要求书

1.一种东方百合的繁殖方法，其特征在于，该方法包括：以东方百合的花丝为外植体，经消毒，愈伤组织诱导，不定芽的诱导，不定芽的增殖，不定芽的诱导生根，组培苗的炼苗和移栽直至形成苗。

2.根据权利要求1所述东方百合的繁殖方法，其特征在于，所述的以东方百合的花丝为外植体，经消毒具体为：取东方百合尚未开放的花苞去其叶片、留少许叶柄，先用体积浓度为70-80％的酒精把花苞的表面擦拭2-3次，然后放在酒精灯的外焰上灼烧5-10min；然后剥去花苞露出内部的花药和花丝部位，将花丝切成0.5-1.5cm长的小段备用。

3.根据权利要求2所述东方百合的繁殖方法，其特征在于，所述的愈伤组织诱导，具体为：先配制愈伤组织诱导培养基，再对培养基进行高压灭菌，待培养基凝固后将消毒后的花丝接种在培养基中，于22-25℃，光照强度1000～2000lux，持续光照时间8～12小时条件下培养6-10周的时间，花丝切口形成明显的凸起即愈伤组织；愈伤组织诱导培养基为：在MS培养基中添加毒莠定0.6～5mg L^-1，蔗糖3％，琼脂0.6％。

4.根据权利要求3所述东方百合的繁殖方法，其特征在于，所述的不定芽的诱导，具体为：将花丝形成的愈伤组织切成0.3-0.7cm长度的小块接种在高压灭菌的、添加了1.0mg L^-1的6-苄氨基腺嘌呤的MS培养基中，其中6-苄氨基腺嘌呤在高压灭菌前加入；然后于22-25℃，光照强度1000～2000lux，光照时间8～12小时条件下培养5-7周，愈伤组织上形成不定芽，不定芽进一步发育形成小鳞茎。

5.根据权利要求4所述东方百合的繁殖方法，其特征在于，所述的不定芽的增殖，具体为：将小鳞茎切成0.5cm×0.5cm大小的小片，置于高压灭菌的添加了0.6mgL^-1的6-苄氨基腺嘌呤和0.2mg L^-1的α-萘乙酸的MS培养基中，6-苄氨基腺嘌呤和α-萘乙酸均在高压灭菌前加入；然后于22-25℃，光照强度1000～2000lux，光照时间8～12小时条件下培养3-5周，小鳞茎上出现呈丛状的不定芽。

6.根据权利要求5所述东方百合的繁殖方法，其特征在于，所述的不定芽的诱导生根，具体为：将诱导出的呈丛状的不定芽分割为单株，然后转入生根培养基中，生根培养基采用低盐培养基即是将MS培养中的元素减半，具体生根培养为在加入了0.1mg L^-1α-萘乙酸和0.01mg L^-1吲哚丁酸中1/2MS培养基中放置12-16天即可生根。

7.根据权利要求6所述东方百合的繁殖方法，其特征在于，所述的组培苗的炼苗和移栽直至形成苗，具体为：将装有组培苗即诱导生根后的不定芽的组培瓶打开一个缝隙，置于温室大棚中进行炼苗，并向组培瓶中倒入无菌水以防止植株失水，控制湿度在75-85％，避免强光直射，炼苗6-8天；6-8天后将苗取出，用无菌水冲掉粘在苗上的培养基后，分别移入经高压灭菌锅灭菌的珍珠岩和蛭石体积之比为1:1的基质中，保持75％的湿度，50％的自然光照，8-12天喷一次稀释10倍的MS营养液，培养成幼苗。