[发明专利]靶向小胶质细胞的高迁移率族蛋白-1 RNAi复合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及靶向小胶质细胞的高迁移率族蛋白-1 RNAi复合物，还涉及靶向小胶质细胞的高迁移率族蛋白-1 RNAi复合物的制备方法和应用。

背景技术

炎症反应在介导脑出血(ICH)继发性损伤中具有重要作用，但启动环节尚不清楚。已有研究表明，在脑出血引起神经损伤最终致死、致残的机制中有两个重要环节，一是ICH早期血肿的机械压迫、占位效应，对脑组织结构破坏损伤。另一方面是血肿成分及代谢产物的继发性神经损伤。但针对ICH早期物理性占位效应的血肿清除术治疗的大型临床试验却未得到预期良好的临床效果，因此近年来ICH继发性损伤的机制及防治成为该领域研究的热点问题。目前认为血肿成分激发的炎症反应在继发性神经损伤中具有重要作用而备受关注。ICH后血肿周围小胶质细胞等炎性细胞激活，释放TNF-α、IL-1等致炎因子，加之血脑屏障破坏，外周血单核巨噬细胞等炎症细胞向血肿周边区聚集，由此诱发炎症级联放大反应，最终导致继发性脑损伤和神经功能缺损加剧。目前针对下游细胞因子等抗炎治疗的临床试验结果并未显示出显著的神经保护效应。因此，深入探讨炎症级联反应的上游启动环节及调节机制是脑出血炎症损伤的关键所在。

高迁移率族蛋白-1(High-mobility group box 1，HMGB1)作为染色质绑定的核蛋白，是最典型的损伤相关模式分子(damage-associated molecular pattern，DAMP)。在细胞内，HMGB1扮演着染色质结合分子的作用，促进p53，p73，Rel/NF-icB，雌激素受体与特定DNA靶点上转录蛋白结合。在细胞外，HMGB1通过与许多受体如晚期糖基化终产物(RAGE)、Toll样受体(TLR)等结合，参与了多种生物学过程，如炎症、细胞迁移、细胞分化和肿瘤发生。但是，HMGB1在小胶质细胞介导的脑出血的炎症损伤领域的应用未见报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供靶向小胶质细胞的高迁移率族蛋白-1 RNAi复合物；本发明的目的之二在于提供靶向小胶质细胞的高迁移率族蛋白-1 RNAi复合物的制备方法；本发明的目的之三在于提供靶向小胶质细胞的高迁移率族蛋白-1 RNAi复合物的应用。

为实现上述发明目的，本发明提供如下技术方案：

1、靶向小胶质细胞的高迁移率族蛋白-1 RNAi复合物，由H9-V9融合肽与高迁移率族蛋白-1 RNAi通过静电作用结合而成，所述H9-V9融合肽由H9肽的羧基端与V9肽的氨基端连接而成，所述H9肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述V9肽的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；所述高迁移率族蛋白-1 RNAi的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。

2、所述靶向小胶质细胞的高迁移率族蛋白-1 RNAi复合物的制备方法，包括如下步骤：在涡旋条件下，向含有高迁移率族蛋白-1 RNAi和氯化钠的水溶液中滴加H9-V9融合肽溶液，滴毕，继续涡旋30～50分钟，再静置10～20分钟，即得靶向小胶质细胞的高迁移率族蛋白-1RNAi复合物。

优选的，所述高迁移率族蛋白-1 RNAi与H9-V9融合肽的质量比为3:1。

优选的，在涡旋条件下，向含有300μg/mL高迁移率族蛋白-1 RNAi和100μg/mL氯化钠的水溶液中滴加等体积浓度为100μg/mL的H9-V9融合肽溶液，滴加完毕后，继续涡旋30～50分钟，再静置10～20分钟，即得靶向小胶质细胞的高迁移率族蛋白-1 RNAi复合物。

3、所述靶向小胶质细胞的高迁移率族蛋白-1 RNAi复合物在制备治疗脑出血后小胶质细胞炎症损伤的药物中应用。

优选的，所述靶向小胶质细胞的高迁移率族蛋白-1 RNAi复合物在制备抑制小胶质细胞炎症因子的药物中的应用。

优选的，所述靶向小胶质细胞的高迁移率族蛋白-1 RNAi复合物在制备减轻脑出血脑水肿的药物中的应用。

优选的，所述靶向小胶质细胞的高迁移率族蛋白-1 RNAi复合物在制备提高脑出血神经功能的药物中的应用。