[发明专利]一种提高金藻油脂含量与多不饱和脂肪酸产量的培养方法

权利要求书

1.一种提高金藻油脂含量与多不饱和脂肪酸产量的培养方法，其特征在于：藻细胞接种于添加氮源的F/2培养基中，于反应器培养过程中通空气培养；平台期将藻细胞收获；添加氮源的F/2培养基是以F/2培养基基础上，以硝酸钠计，调整初始氮元素浓度至 30~40mg/L，而磷源、金属元素、微量元素各添加常规F/2的2~3倍； F/2营养盐母液配制：

(1) 氮源：称取75g NaNO₃溶于1L去离子水;

(2) 磷源：称取5g NaH₂PO₄·H₂O溶于1L去离子水;

(3) 金属元素：分别称取3.15g FeCl₃·6H₂O, 4.36g Na₂EDTA, 0.0098g CuSO₄·5H₂O,0.0063g Na₂MoO₄·2H₂O, 0.022g ZnSO₄·7H₂O, 0.01g CoCl₂·6H₂O, 0.18g MnCl₂·4H₂O溶于1L去离子水;

(4) 维生素：0.001g vitamin B₁₂, 0.2g vitamin B₁, 0.001g D-生物素，溶于1L去离子水;

常规F/2培养基的制备：

天然海水经过滤灭菌后备用；向海水中添加上述(1),(2),(3),(4)制得的无硅酸盐的F/2营养盐，其中氮源、磷源、金属元素各1ml/L，维生素0.5ml/L；

在指数生长期，以硝酸钠计，每天向培养体系补加12.5mg/L的氮元素，即以硝酸钠计，在每500mL培养体系中培养第3天起每天补加12.5mg/L的氮元素；所述空气为常规的空气，无额外任何浓度的CO₂通入。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的反应过程中仅通常规的空气培养，通气速率为0.1vvm~0.3vvm。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的反应器为光生物反应器。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：金藻培养过程是指金藻由指数生长期培养至平台期时收获生物质。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：培养温度23～27℃，光强110～150 µmol.m^-2s^-1，光暗比为14h：10h。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：添加氮源的F/2培养基是指接种时使用3 xF/2培养基，即氮源、磷源、金属元素、微量元素各添加常规F/2的3倍。