[发明专利]一种反刍动物内源氮排泄量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及反刍动物内源氮排泄量测定领域，更具体涉及一种测定反刍动物消化道不同 部位内源氮排泄量的方法，以便于准确定量测定反刍动物消化道不同部位内源氮排泄量，降 低测定成本；并通过营养调控手段，降低反刍动物氮排放。

背景技术

动物即使在采食无氮日粮时，其粪便和尿液中仍还有一定氮素，此类氮即为内源氮，是 动物生理代谢过程中不可避免的。粪中内源氮主要来源于动物体内酶、肠脱落细胞、血浆清 蛋白、氨基酸等；而尿中内源氮主要来源于动物机体内氮代谢产物如尿素和尿酸等。目前， 关于动物消化道内源氮排泄量的测定方法，主要采用无氮日粮法、完全可消化蛋白源或静脉 灌注平衡氨基酸法、肽营养超滤技术、回归分析法、高精氨酸法、氨基酸库法和同位素标记 内(外)源氮法，这些测定方法在理论、技术或应用等方面均或多或少存在某些不足。无氮 日粮法是动物处于非正常生理条件下测定内源氮最简单的经典方法，但由于动物处在非正常 的生理状态，缺乏日粮蛋白质或肽对消化酶的刺激，因此低估内源氮排泄量；完全可消化蛋 白源或静脉灌注平衡氨基酸法，该方法的前提条件是酪氨酸或平衡氨基酸在消化道内被完全 吸收，而事实上日粮粗纤维水平和抗营养因子等含量均影响内源氮的排泄与吸收；肽营养超 滤技术的不足之处在于超滤技术本身的技术难度以及没有考虑日粮因素对内源氮损失的影 响；回归分析法与无氮日粮法并没有本质差异；高精氨酸法适用于日粮仅有唯一蛋白质来源 的情况，且日粮赖氨酸胍基化的充分与否随日粮蛋白质来源的不同而有差异；氨基酸库法涉 及到动物体多个组织取样和内容物中内源氨基酸的测定，在实际应用中较为复杂；同位素标 记内源氮法的不足在于该方法计算过程较为复杂、费用昂贵；同位素标记外源氮法费用昂贵， 且其最大疑义是随着食入标记饲料之后时间的延长，再循环干扰增大，吸收后又进入肠腔的 标记内源氮排泄量逐渐增多，外源氮流量测定值偏高，导致低估内源氮排泄量；同时费用昂 贵。

大气中二氧化碳(CO₂)约含98.9％¹²C和1.1％¹³C同位素，光合作用过程中植物是排斥 ¹³C的，而动物在利用日粮氨基酸合成体蛋白时并不排斥由¹³C来提供碳架。植物可通过两条 途径固定CO₂，一是C₄途径，该途径的CO₂受体是叶肉细胞细胞质中的磷酸烯醇式丙酮酸， 在磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶催化下，固定HCO₃^ˉ(CO₂溶解于水)，生成含四个碳原子的二羧 酸-草酰乙酸，所以这个反应途径称为四碳双羧酸途径，简称C₄途径；其二是C₃途径，该途 径的CO₂受体是一种戊糖，即核酮二磷酸，故又称为还原戊糖磷酸途径，这个途径的CO₂固 定最初产物是一种三碳化合物，故又称为C₃途径。植物在固定CO₂时，C₄途径比C₃途径对 ¹³C的排斥程度低。小麦、大麦和大豆是C₃植物，而玉米、高粱和甘蔗是C₄植物。在植物生 理学上，¹³C丰度通常用δ¹³C(‰)表示，C₃和C₄植物的δ¹³C分别为-28.1±2.5‰和-13.5±1.5‰。， 其计算公式为：