[发明专利]一种从藻类中提取DHA藻油及藻类蛋白的方法

权利要求书

1.一种从藻类中提取DHA藻油及藻类蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将藻类发酵液经离心后，取沉淀，制得菌液；然后向菌液中加入无水乙醇，菌液与无水乙醇的重量体积比为（0.5～2）:1，单位kg/L，静置25～40min，然后在20～40℃的温度，80～120Mpa的压力条件下，进行高压均质破壁，循环破壁2～4次，制得破碎菌液；

（2）将步骤（1）制得的破碎菌液经有机溶剂多级萃取，制得萃取液和菌渣；

（3）将步骤（2）制得的萃取液经低温真空浓缩后，制得DHA粗藻油；然后经碱炼、脱胶、脱色，制得DHA藻油；

（4）将步骤（2）制得的菌渣经离心、水洗、干燥后制得藻类蛋白。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中的藻类发酵液，制备步骤如下：

I、取藻类接种于活化培养基中，在28～32℃下活化培养20～28h，制得活化菌种；

II、将步骤I制得的活化菌种按重量百分比5～10%接种于发酵培养基中，在28～32℃的条件下发酵培养50～65h，然后流加浓度450～600g/L的葡萄糖溶液，使发酵液中的葡萄糖浓度为10g/L～15g/L，继续发酵20～30h，制得藻类发酵液。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的活化培养基组分如下，均为重量份：

葡萄糖20g/L、蛋白胨5g/L、酵母浸粉10g/L、海水晶20g/L，水定容至1L，pH5.0。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的发酵培养基，组分如下：

葡萄糖40g/L、蛋白胨5g/L、酵母浸粉10g/L、海水晶20g/L，水定容至1L，pH5.0。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中，离心采用碟式离心机，离心条件为3000rpm，3m³/h。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中，菌液与无水乙醇的重量体积比为1：1。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中，高压均质破壁的压力为90Mpa，循环破壁次数为3次。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中，所述的藻类为裂殖壶菌。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中，有机溶剂多级萃取，包括如下步骤：

a、将破碎菌液与2～3倍体积的有机溶剂混合后，在40～50℃的温度条件下以40～50rpm的转速搅拌5～15min；静置30～40min进行一级萃取后，去除下层的水相和中间层的菌渣，取上层有机相，制得一级萃取液；

b、将步骤a去除的水相和菌渣经离心后，取菌渣与2～3倍体积的有机溶剂混合后，在40～50℃的温度条件下以40～50rpm的转速搅拌5～15min；静置30～40min进行二级萃取后，去除下层的水相和中间层的菌渣，取上层有机相，制得二级萃取液；

c、合并步骤a制得的一级萃取液和步骤b制得的二级萃取液，制得萃取液。

10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）的有机溶剂为正己烷。

11.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述步骤a中，还包括在加入有机溶剂后按体积百分比为5%的比例加入质量浓度为95%的乙醇溶液的步骤。

12.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述步骤c低温真空浓缩后还包括回收有机溶剂循环回用于步骤a的步骤。

13.如权利要求9所述的方法，所属步骤b和步骤c中：温度为45℃、搅拌速度为45rpm、搅拌时间为10min。

14.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（3）中，低温真空浓缩为经压力-0.08Mpa、温度40～50℃的条件进行低温真空浓缩。