[发明专利]一种基于纳米金化学发光快速检测三聚氰胺的方法

说明书

技术领域

本发明属于化学检测技术领域，具体的说，本发明涉及一种基于纳米金化学发光快速检测三聚氰胺的方法。 

背景技术

三聚氰胺(melamine)化学名称为2,4,6-三胺基-1,3,5-三嗪(2,4,6-triamino-1,3,5-triazine)或1,3,5-三嗪-2,4,6-三胺(1,3,5-triazine-2,4,6-triamino)，是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，俗称密胺、蛋白精。作为一种重要的氮杂环有机化工原料，主要用途是与醛缩合，生产塑料。由于其形态酷似蛋白粉，无异味，含氮量高达66％，远高于普通蛋白质的含氮量，慢性毒性不容易被发现。添加该品可引起凯氏定氮法测得的表观上蛋白质质量分数提高，产品质量“合格”，同时大幅降低生产成本，因此常被不法分子作为蛋白质替代品添加到乳品、饲料中。三聚氰胺本身毒性较小，长期或反复摄入可能对肾和膀胱产生影响，导致结石产生。鉴于三聚氰胺的人为添加会对消费者造成危害，我国有关部门已发布了三聚氰胺限量值的公告。 因此，对三聚氰胺进行有效的检测对于食品尤其乳制品的安全具有一定的意义。 

目前国内外常用于三聚氰胺的检测方法，主要有高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱-质谱联用法、免疫分析法、毛细管电泳法、气质联用法、荧光光度法等。这些方法及技术各有各的优点和使用范围。在这些分析方法中，HPLC法是最常用的检测方法，具有高效、快速、灵敏度高、检出率高等特点；但由于前处理较复杂，所需仪器较昂贵，操作繁琐、费时，所用试剂毒性较大，污染环境，且对实验操作人员具有一定的技术要求，不适于三聚氰胺的快速检测。气质联用和液质联用技术虽然是目前较先进的检测方法，但其设备昂贵，试剂消耗量大，检测成本高，仅能于部分实验室作为确证方法使用，不适合广泛使用。毛细管电泳法分离度高，分离效果好，所用试剂量小，价廉无污染，但灵敏度不够高。近红外吸收法虽然选择性好，可实现在线检测，但设备价格昂贵，需要不断进行校准，样品基质中的干扰是近红外分析精度及重现性的一大障碍。免疫分析法灵敏度高，可适用于大量样品的快速筛选，但是操作繁琐、费时。比色法方便快捷，价廉易操作，但只适用于三聚氰胺含量大时进行筛选，无法进行痕量检测，且当待测物碱性大时误差亦较大。拉曼光谱技术以及核磁共振法虽然能够满足快捷简易的要求，但是仪器本身比较昂贵。因此，发展简便、快速且实用性强的用于三聚氰胺检测的分析方法显得很有必要。 

针对现有技术存在的相对不足，提出本发明。 

发明内容

本发明的目的是解决了目前检测三聚氰胺分析方法存在的局限性：包括使用大型昂贵的仪器、分析成本高、灵敏度不能满足各方面的需求；操作麻烦且对分析人员的要求较高；分析测定时间较长。利用三聚氰胺能够增强鲁米诺-过氧化氢-纳米金体系化学发光信号，建立一种全新的简单灵敏基于纳米金催化化学发光分析测定三聚氰胺的方法。 

本发明提供的技术方案是：一种基于纳米金化学发光快速检测三聚氰胺的方法，包括以下步骤： 

步骤1)，移取纳米金溶液和含有三聚氰胺的溶液于一离心管中，充分混匀，作用5分钟使得纳米金达到最佳的团聚态；所述的纳米金溶液中的纳米金的粒径为2.6nm，浓度为5.0×10^-7mol/L。所述的2.6nm纳米金溶液的制备过程为：在室温、强力搅拌的条件下，将100mL的HAuCl₄(0.01％w/w)水溶液、1mL的1％柠檬酸三钠溶液和1mL的0.075％NaBH₄/1％柠檬酸三钠溶液完全混合，混合后溶液搅拌30分钟，完全反应后，于4℃冰箱保存待用。所述的鲁米诺–过氧化氢化学发光试剂选择鲁米诺的浓度为4×10^-5mol/L，过氧化氢浓度为4×10^-2mol/L，鲁米诺和过氧化氢的体积比为2:1。所述的鲁米诺–过氧化氢化学发光试剂的pH值为12.0。 

步骤2)，移取上述纳米金溶液和三聚氰胺溶液的混合溶液于化学发光池中，采用静态注射的方式注入鲁米诺–过氧化氢化学发光试剂， 通过IFFL-D流动注射化学发光分析仪测定并记录其化学发光强度，根据测定结果进行判定。 

本发明提供的另外的技术方案是：将步骤1)中所述的鲁米诺–过氧化氢化学发光试剂用鲁米诺-高碘酸钾化学发光试剂代替。 

本发明的有益效果是：