[发明专利]一种发酵床陈化垫料的快腐菌剂、有机肥及其生产方法

权利要求书

1.一种发酵床陈化垫料的快腐菌剂，其特征在于，是由保藏编号为CCTCC NO:M 2014464的高温芽孢杆菌(Bacillus sp.)N8，保藏编号为CCTCC NO:M2014465的高温链霉菌(streptomycete sp.)F2和保藏编号为CCTCC NO:M2014466的草酸青霉(Penicillium oxalicum)M1分别发酵后混合而成。

2.根据权利要求1所述的发酵床陈化垫料的快腐菌剂，其特征在于，按重量百分比高温芽孢杆菌N8发酵物粉剂20-40％，高温链霉菌F2发酵物粉剂20-40％，草酸青霉M1发酵物粉剂20-40％充分混匀既得陈化垫料快腐菌剂，其总活菌数不低于1.0×10¹⁰cfu/g。

3.根据权利要求2所述的发酵床陈化垫料的快腐菌剂，其特征在于，按重量百分比：高温芽孢杆菌N8发酵物粉剂︰高温链霉菌F2发酵物粉剂︰草酸青霉M1发酵物粉剂＝1︰1︰1，充分混匀即得陈化垫料快腐菌剂。

4.根据权利要求1所述的发酵床陈化垫料的快腐菌剂，其特征在于，由以下方法制备而成：

1)高温芽孢杆菌N8发酵物粉剂制备

将高温芽孢杆菌N8接种于固体种子培养基斜面上，在40～45℃条件下活化培养24～36h；

固体种子培养基：胰蛋白胨10g/L；酵母提取物5g/L；氯化钠10g/L；琼脂20g/L；pH7.0-7.2；

将高温芽孢杆菌N8从固体种子培养基斜面上接种于液体种子培养基中，在40～45℃条件下活化培养24～36h，所得摇瓶培养菌液为种子液；

液体种子培养基：胰蛋白胨10g/L；酵母提取物5g/L；氯化钠10g/L；pH7.0-7.2；

然后进行发酵罐培养：发酵罐中培养基装量为总体积的50-70％，接种量占培养基体积的1-3％，发酵温度40-45℃，通入无菌空气，180-200rpm搅拌培养，通气体积与发酵液体积的比值0.9:1-1:1，罐压0.03-0.05Mpa；发酵终点为芽孢数不低于总菌数的90％，且发酵液的活菌数在1.0×10¹⁰-1.5×10¹⁰cfu/ml之间，发酵罐培养基各组分质量百分比为:葡萄糖0.5-0.7％，可溶性淀粉0.3-0.5％，豆饼粉1.0-1.5％，硫酸锰0.0062％，酵母粉0.8-1.0％，蛋白陈0.3-0.5％，氯化铁0.01％，磷酸二氢钾0.4％，碳酸钙0.1％，硫酸镁0.05％，其余为水，pH7.0-7.2；最后进行固体吸附:将粉粹的泥炭进行灭菌，然后和发酵液混合均匀，即为菌剂产品；菌剂产品含菌量在2.0×10⁹-5.0×10¹⁰cfu/g之间，粉末粒径≤0.2mm；

2)高温链霉菌F2发酵物粉剂制备

链霉菌F2接种于固体种子培养基斜面上，在40～45℃条件下活化培养2～3d，待斜面上形成大量孢子；

链霉菌F2斜面固体培养基：可溶性淀粉20g/L；硝酸钾1g/L；氯化钠0.5g/L；磷酸氢二钾0.5g/L；硫酸镁0.5g/L，硫酸亚铁0.01g/L；琼脂20g/L；pH7.2-7.4；

从活化好的斜面上刮取孢子，用无菌水制成均匀的孢子悬液，再将孢子悬液接种至链霉菌产孢子培养基，40-45℃，180-200rpm摇床震荡培养3-5d，所得摇瓶培养菌液为种子液；

链霉菌产孢子培养基：酵母抽提物1.8-2.0％，可溶性淀粉1.5-2.0％，麦芽糖4.5-5.0％，六水氯化钴0.00025％，pH 7.2-7.4；

然后进行发酵罐培养：发酵罐中培养基装量为总体积的50-70％，接种量占培养基体积的1-3％，发酵温度40-45℃，通入无菌空气和搅拌，180-200rpm搅拌培养，通气体积与发酵液体积的比值0.9:1-1:1，罐压0.03-0.05Mpa；发酵终点为孢子数不低于总菌数的90％，且发酵液的活菌数在1.0×10¹⁰-1.5×10¹⁰cfu/ml之间，发酵罐培养基各组分质量百分比为:酵母抽提物1.8-2.0％，可溶性淀粉1.5-2.0％，麦芽糖4.5-5.0％，六水氯化钴0.00025％，pH 7.2-7.4；最后进行固体吸附:将粉粹的泥炭进行灭菌，然后和发酵液混合均匀，即为菌剂产品。菌剂产品含菌量在2.0×10⁹-5.0×10¹⁰cfu/g之间，粉末粒径≤0.2mm；

3)草酸青霉M1发酵物粉剂制备

将草酸青霉M1接种于固体种子培养基斜面上，在30～35℃条件下活化培养3～5d；

固体种子培养基：马铃薯200g/L；葡萄糖20g/L；琼脂20g/L；pH自然；

将草酸青霉M1从固体种子培养基斜面上刮取孢子接种于液体种子培养基中，在30～35℃条件下活化培养1～3d，待形成大量菌丝体即制备种子液；

液体种子培养基：马铃薯200g/L；葡萄糖20g/L；pH自然；

然后进行固体发酵培养：按重量比将菌液5％-10％和固体培养基90％-95％的比例，接种于固体培养基中，混匀，置于28-30℃培养条件下，培养5-7d，35-40℃干燥，然后粉碎，粉剂产品含菌量在2.0×10⁹-5.0×10¹⁰cfu/g之间，粉末粒径≤0.2mm；

霉菌固体发酵培养基：

玉米粉5-15g，麸皮85-95g，无机盐营养液75-85ml：(NH₄)₂SO₄0.5g,K₂HPO₄0.1g，MgSO₄·7H₂O 0.025g，pH值自然，将玉米粉、麸皮和无机盐营养液搅拌混匀，压力1.05kg/cm²、灭菌20min；

4)陈化垫料快腐菌剂复配

按重量百分比将高温芽孢杆菌N8发酵物粉剂，高温链霉菌F2发酵物粉剂，草酸青霉M1发酵物粉剂充分混匀既得陈化垫料快腐菌剂。