[发明专利]基于G-四面体/hemin的光电化学多功能传感器

权利要求书

1.基于G-四面体/hemin的光电化学多功能传感器，其特征在于： 

a、以巯基己醇和带有羧基的化合物共同作为表面修饰剂制备水溶性PbX(X代表硫、硒)量子点。具体步骤为：将一定量的巯基己醇和带有羧基的化合物与水溶性铅盐溶液混合后，用1mol/L的NaOH溶液调节溶液的pH为碱性；然后通入高纯氮气30min后，加入Na₂S(或者NaHSe)水溶液，继续通N₂搅拌，在一定温度下加热反应一定时间，得水溶性PbX(X代表硫、硒)量子点。 

b、将经过预处理的ITO玻璃片浸在含有0.1mmol/L NaCl的2％PDDA聚合物的溶液中，10分钟后用去离子水冲洗电极表面；然后再浸入到水溶性PbX(X代表硫、硒)量子点溶液中，10分钟后用去离子水清洗电极表面。以上步骤可将PbX(X代表硫、硒)量子点修饰到ITO电极上。 

c、以制得的PbX(X代表硫、硒)量子点修饰的ITO电极作为工作电极，通过缩合反应将捕获核酸序列所带NH₂与电极表面PbX(X代表硫、硒)量子点表面的COOH共价相连，从而将捕获探针固定到电极表面。具体操作为将PbX(X代表硫、硒)量子点修饰电极浸在含有20mg EDS和10mg NHS的1mL水溶液中反应1小时，再用清洗液(含有0.02％Tween-20的0.01mol/L pH 7.4的Tris-HCl缓冲溶液)冲洗电极表面。然后，滴加25μL 1.0×10^-6mol/L捕获核酸序列在4度下反应过夜，用清洗液冲洗电极表面；接着用25μL封闭液(含有0.1mol/L KCl、1.0mmol/L单乙醇胺或者0.02％Tween-20以及3％BSA的0.01mol/L Tris-HCl(pH 7.4)缓冲溶液)封闭30min以除去电极表面的活性位点，用清洗液冲洗；将电极放入含有0.05mol/L KCl和0.1mol/L NaCl的一定pH的缓冲溶液组成电解质溶液中，以银/氯化银(饱和KCl)电极作为参比电极，铂丝作为对电极，一定电位下在自制的光电化学测定仪器上进行光电流测定。 

d、随后，将电极表面加入不同浓度的待测目标物和1.0×10^-6mol/L hemin后反应30-60分钟，用清洗液冲洗；将电极放入电解质溶液中观察光电流的变化情况。 

2.根据权利要求1所述的基于G-四面体/hemin的光电化学多功能传感器，其特征在于所述的PbX(X代表硫、硒)量子点的表面修饰剂为巯基己醇和带有羧基的化合物组成的混合物，带有羧基的化合物选自巯基乙酸，巯基丙酸，半胱氨酸，二巯基丁二酸，油酸，聚丙烯酸，表面修饰剂的总量为铅离子的物质的量的3-20倍，带有羧基的化合物和巯基己醇的物质的量之比为2∶1-25∶1。 

3.根据权利要求1所述的基于G-四面体/hemin的光电化学多功能传感器，其特征在于合成PbX(X代表硫、硒)量子点时所选用的反应温度为50-100度，反应时间为1-6小时。 

4.根据权利要求1所述的基于G-四面体/hemin的光电化学多功能传感器，其特征在于光电化学测定时所使用的缓冲溶液为含有0.05mol/L KCl和0.1mol/L NaCl的Tris-HCl缓冲溶液，缓冲溶液的pH为6.0-9.0。 

5.根据权利要求1所述的基于G-四面体/hemin的光电化学多功能传感器，其特征在于光电流测定时采用的电压为(-0.3)-(+0.3)V(相对于Ag/AgCl参比电极)。 

6.根据权利要求1所述的基于G-四面体/hemin的光电化学多功能传感器，其特征在于光电化学测定的目标物为DNA，凝血酶，三磷酸腺苷，单磷酸腺苷，铅(II)离子。