[发明专利]一种香港四照花组织培养方法

权利要求书

1.一种香港四照花组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

①前处理：选取生长较整齐的香港四照花茎段，用无菌水冲洗干净后，切成0.7～0.8cm长的小段，

②初代培养：将上述得到的小段用初代培养基进行诱导培养，PH5.8～6.0，培养温度23～25℃，光照周期为8～10h/d，光照强度为1800～2000lux，增殖培养周期为40～45天， 选取生长状态好、颜色浓绿的芽进入下一阶段；

其中初代培养基包括：母培养基+蔗糖20000～35000 mg/L+卡拉胶6000～ 7000mg/L+6-BA 3～4mg/L+NAA 0.1～0.2mg/L；

③增殖培养：将诱导出来的健康小芽转入继代增殖培养基中进行增殖培养， PH5.8～6.0，培养温度23～25℃，光照周期为8～10h/d，光照强度为1800～2000lux，增殖培养周期为30～35天，待新芽高度长至3.5～4.0cm时，选取颜色正常，生长健壮的芽开始下一阶段；高度未达到3.5cm的芽单独取出，再次进行增殖培养；

其中继代增殖培养基包括：母培养基+蔗糖20000～35000 mg/L+卡拉胶6000～ 7000mg/L+6-BA 2～3mg/L+NAA 0.06～0.12mg/L；

④壮苗培养：将增殖培养基中培养后的芽在壮苗培养基中进行培养30～35天，PH5.8～6.0，培养温度23～25℃，光照周期为8～10h/d，光照强度为1800～2000lux；

其中壮苗培养基包括：母培养基+蔗糖20000～35000 mg/L+卡拉胶6000～ 7000mg/L+6-BA 1～2mg/L+NAA 0.1～0.3mg/L，

⑤生根培养：继续接种到生根培养基中进行生根培养，培养30～35天，PH5.8～6.0，培养温度23～25℃，光照周期为8～10h/d，光照强度为1800～2000lux，待根长至2.0～2.5cm时，开始下一阶段，生根率达到80%以上，

其中生根培养基包括：母培养基+蔗糖20000mg/L+卡拉胶6000～ 7000mg/L+ IBA 0.2～1mg/L+NAA 0.1～0.3mg/L，

⑥移栽：将长高至3～5cm、生根了的培养苗根部洗净后移植于含有砻糠灰与黄心土体积比为1:1的营养杯中，放置大棚内，控制培养温度25～28℃，保持相对湿度 85％～95％，前期用遮阳网遮阴处理20d，后逐渐除去遮阳网，成活后全光照。

2.根据权利要求所述的一种香港四照花组织培养方法，其特征在于：所述母培养基组成包括大量元素、微量元素、铁盐、有机附加物，所述母培养基按浓度计，包括：

大量元素：硝酸钾1600～4000mg/L、硝酸铵1400～3200mg/L、七水硫酸镁300～340mg/L、硫酸二氢钾150～180mg/L、二水氯化钙200～480mg/L；

微量元素：碘化钾0.8～1.0mg/L、四水硫酸锰20～25mg/L、七水硫酸锌、8～10mg/L、硼酸6～7mg/L、五水硫酸铜0.02～0.03mg/L、氯化钴0.02～0.03mg/L、二水钼酸钠0.2～0.3mg/L；

铁盐：七水硫酸亚铁25～30mg/L、乙二胺四乙酸二钠35～40mg/L；

有机成分：盐酸硫胺素0.1～0.3mg/L、盐酸吡哆辛0.4～0.8mg/L、烟酸0.4～0.8mg/L、甘氨酸1～3mg/L、肌醇100～130mg/L。