[发明专利]BMP-2基因修饰的组织工程骨及其制备方法

权利要求书

1.BMP-2基因修饰的组织工程骨，其特征在于，其是由骨支架材料和BMP-2基因修饰的骨髓间质干细胞(bMSCs)构建而成。

2.根据权利要求1所述的BMP-2基因修饰的组织工程骨，其特征在于，所述骨支架材料是由100重量份的聚己内酯(PCL)，20重量份的聚丁二酸丁二醇酯(PBS)，20重量份的聚丙交酯乙交酯共聚物(PLGA)和50重量份的磷酸三钙(TCP)组成；或者是由100重量份的聚己内酯(PCL)，30重量份的聚丁二酸丁二醇酯(PBS)，25重量份的聚丙交酯乙交酯共聚物(PLGA)和40重量份的磷酸三钙(TCP)组成。

3.根据权利要求2所述的BMP-2基因修饰的组织工程骨，其特征在于，所述骨支架材料还经过天然高分子修饰，所述的天然高分子是高分子明胶，优选重均分子量为30,000～50,000的明胶、胶原蛋白或壳聚糖。

4.根据权利要求2所述的BMP-2基因修饰的组织工程骨，其特征在于，所述骨支架材料是具有两种不同孔径的介孔，所述介孔的孔径(直径)为75～100μm和450～500μm。

5.一种制备权利要求1所述的BMP-2基因修饰的组织工程骨的方法，其特征在于，具体步骤如下：

1)腺病毒介导的BMP-2转染体外培养的骨髓间质干细胞；

2)将步骤1)得到的产物、骨支架材料复合构建组织工程化骨，其中，BMP-2腺病毒载体工作浓度分别为50pfu/细胞；腺病毒介导的BMP-2以MOI＝50pfu/cell转染体外培养的骨髓间质干细胞，所述骨髓基质细胞来源鼠、兔、羊、狗、猪骨髓基质细胞，所述复合构建是指细胞密度为5×10⁷/ml的细胞悬液与生物支架材料复合。

6.根据权利要求5所述的制备BMP-2基因修饰的组织工程骨的方法，其特征在于，所述骨支架材料的制备方法为：

1)将PCL、PBS和PLGA搅拌溶解于二氧六环中，在40℃下高速搅拌使其溶解充分，得到澄清溶液；PCL、PBS和PLGA在溶液中的总浓度为0.2g/ml；

2)将磷酸三钙粉体、粒径(直径)为450～500μm的NaCl粒子和粒径(直径)为75～100μm的NaHCO₃粒子加入到步骤1的溶液中，超声使无机物分散均匀，-20℃冷冻过夜得固形物；PCL、PBS和PLGA的重量为致孔剂重量的1/4，所述致孔剂为NaCl和NaHCO₃，两者的重量比为1:1；

3)将固形物依次置于-20℃的无水乙醇溶液中12h和pH值为5的盐酸溶液中24h，最后将固形物浸没与双蒸水中，每12h换水一次，6天后取出，冷冻干燥即得；

4)在负压条件下，以京尼平(Genipin)为交联剂、水为分散介质，由步骤3)获得的骨支架材料与天然高分子交联获后获得。

7.根据权利要求1-4所述的BMP-2基因修饰的组织工程骨，其特征在于，任一项所述组织工程骨在制备治疗颌骨损伤中的应用。