[发明专利]一种高密度发酵枯草芽孢杆菌的方法

说明书

技术领域

本发明属于农业应用微生物技术领域。

背景技术

目前我国水产养殖业主要以高密度养殖为主，因此养殖户面临着一方面为了追求高产量而不断加大饲料投放量，一方面由于大量残饵、养殖动物粪便排放过多而造成水体的氨氮及亚硝酸盐升高影响鱼虾个体大小和产量的矛盾。目前市场上农用枯草芽孢杆菌产品质量参差不齐，急需提高枯草芽孢杆菌的发酵水平。

发明内容

技术问题

本发明的目的是提供“一种高密度发酵枯草芽孢杆菌的方法”，提高了产品的菌含量，降低了养殖户的使用成本。

技术方案

本发明所述的一种高密度发酵枯草芽孢杆菌的方法，其步骤如下： 

（1）将活化好的枯草芽孢杆菌按5%-10%的接种量接种到培养基中进行摇床培养，该培养基为：蔗糖15-20g/l、蛋白胨3-5g/l、氯化钠5-10g/l、PH=7.0-7.2。培养条件为：150-200r/min、温度为35-37度、通气量为1:1；培养24-48小时；

（2）将椰子壳粉碎成30-60目的粉状，用自来水按1:1的比例浸泡12-24小时；

（3）将浸泡好的椰子壳、麸皮、豆粕粉按（1-2）：（2-5）：（2-5）的比例进行混匀，配成固体培养基，高温灭菌，灭菌温度为80~121度，灭菌时间为0.5~1小时，然后冷却至30~40度后，将步骤1的枯草芽孢杆菌液体在无菌条件下接种到固体培养基中，混匀，然后置30-40度温度下进行通气培养，培养时间为24~48小时；

（4）将步骤3培养好的固体芽孢菌进行烘干，烘干温度为45~60度，然后进行粉碎，即得高密度枯草芽孢杆菌粉剂；菌含量大于等于10¹¹cfu/g。

 

 具体实施方式：

 实施例1：

（1）将活化好的枯草芽孢杆菌按10%的接种量接种到培养基中进行摇床培养，该培养基为：蔗糖20g/l、蛋白胨5g/l、氯化钠10g/l、PH=7.0。培养条件为：1200r/min、温度为37度、通气量为1:1；培养24小时；

（2）将椰子壳粉碎成60目的粉状，用自来水按1:1的比例浸泡12小时；

（3）将浸泡好的椰子壳、麸皮、豆粕粉按1:3:2的比例进行混匀，配成固体培养基，高温灭菌，灭菌温度为121度，灭菌时间为0.5小时，然后冷却至40度后，将步骤1的枯草芽孢杆菌液体在无菌条件下接种到固体培养基中，混匀，然后置34度温度下进行通气培养，培养时间为36小时；

（4）将步骤3培养好的固体芽孢菌进行烘干，烘干温度为60度，然后进行粉碎，即得高密度枯草芽孢杆菌粉剂；菌含量为3.4×10¹¹cfu/g。