[发明专利]具有益生作用的短小芽孢杆菌315及其应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物学领域，具体地说，涉及一种具有益生作用的短小芽孢杆菌315及其应用。

背景技术

随着我国畜牧业的快速发展，其数量与质量、生产与环境以及效益与资源之间的矛盾越来越突出。尤其是畜禽排泄物对环境造成的污染日趋严重，大量的有害物排放使得畜禽场污染物中的BOD(生化需氧量)和COD(化学需氧量)值急剧上升，同时也成为一些疾病发生和传播的潜在诱因。

另一方面，食品安全问题正引起越来越多的关注，在造成食品安全问题的诸多原因中，重要原因之一是饲料中使用抗生素作为促生长剂。客观上，抗生素自20世纪50年代以来广泛应用于畜禽养殖业，在促进动物生长，保证动物健康，节约饲料成本，提高经济效益等方面做出了巨大贡献。但由于抗生素在动物养殖业中的长期使用，近些年来，由其所致的毒副作用和药物残留问题已引起人们的关注。2006年，欧盟已经全面禁止了饲料中抗生素的使用，美国和日本等国家也对其做出了严格的限制。2011年，韩国全国禁止在动物饲料中添加抗生素。

随着人们对畜产品安全和环境保护意识的不断加强，作为抗生素的替代品，益生菌越来越多的应用于动物营养和饲料中。益生菌是一类能改善动物胃肠道微生态平衡，有益于动物健康和生产性能发挥的微生物添加剂。其主要作用效果体现在改善动物新陈代谢，提高营养物质吸收和利用，提高免疫力，减少环境污染等方面发挥重要作用。

由于芽孢杆菌对干燥、高温、高压、氧化等不良环境抵抗力很强，这种稳定性增加了它作为益生菌的潜力。因此，获得新型具有益生特性的芽孢杆菌的研究具有重大意义。分离和筛选抗病原菌且具有益生效果的短小芽孢杆菌，可以更好的应用于饲料添加剂，以代替抗生素。但短小芽孢杆菌作为益生菌制剂或饲料添加剂的研究与应用较少，尤其是在替代饲养抗生素和减少环境污染等方面。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有益生作用的短小芽孢杆菌315及其在动物饲料中的应用。

为了实现本发明的目的，本发明的短小芽孢杆菌315(Bacillus pumilus)是从养猪场附近土壤中筛选到的一株芽孢杆菌。经16S rRNA基因序列分析和体外益生效果评价，该菌株为能够抑制病原菌且具有益生和减少畜禽养殖环境污染效果的短小芽孢杆菌，其16S rRNA序列如SEQ ID NO.1所示。该菌株已于2014年3月3日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)，保藏号为CGMCC No.8878。

短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)315的微生物学特性为：革兰氏阳性菌，无鞭毛和荚膜；菌体表面干燥，有褶皱，不透明，灰白色；需氧菌；可利用蛋白质、多种糖及淀粉。

本发明提供含有该短小芽孢杆菌315的菌剂。

本发明还提供短小芽孢杆菌315或上述菌剂在广谱抗菌中的应用。其中，短小芽孢杆菌315的抑菌谱包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌；所述革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌，如Staphylococcus aureus IVDC C56005(中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心)；所述革兰氏阴性菌为致病性大肠杆菌，如K88(Escherichia coli IVDC C83901)，鼠伤寒沙门氏菌，如Salmonella typhimurium IVDC C79-13(中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心)。

本发明还提供一种含有该短小芽孢杆菌315的动物饲料添加剂。该饲料添加剂含有短小芽孢杆菌315的活菌数为1×10⁹CFU/g～1×10¹⁰CFU/g；优选地，含有短小芽孢杆菌315的添加剂的活菌数为5×10⁹CFU/g。

本发明还提供一种含有该具有益生作用的短小芽孢杆菌315饲料添加剂的动物饲料。其中，所述动物饲料中短小芽孢杆菌315饲料添加剂的添加量为质量百分比的1‰。因此，动物饲料中短小芽孢杆菌315的活菌数为1×10⁹CFU/kg～5×10⁹CFU/kg，优选5×10⁹CFU/kg。

本发明通过体外法鉴定了短小芽孢杆菌315的益生效果，结果表明，短小芽孢杆菌315能够耐酸、酸胆盐，能抵抗胃肠道的内环境，具备益生菌的潜力。