[发明专利]一种关于抗体的蛋白质含量的检测方法无效
| 申请号： | 201410440707.4 | 申请日： | 2014-09-02 |
| 公开（公告）号： | CN104155387A | 公开（公告）日： | 2014-11-19 |
| 发明（设计）人： | 刘玉应;丁兆;张仁怀;胡勋;雷富彬 | 申请（专利权）人： | 四川汇宇制药有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 无 | 代理人： | 无 |
| 地址： | 641000 四川省*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 关于 抗体 蛋白质 含量 检测 方法 | ||
1.一种关于抗体的蛋白质含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
配制一组不同浓度的抗体标准品，用蛋白质层析系统测定所述抗体标准品的峰面积，由所述峰面积和浓度梯度得出标准曲线；
用蛋白质层析系统测定抗体样品的峰面积，由所述的标准曲线计算出样品的浓度，即得抗体的蛋白质含量。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的用蛋白质层析系统测定，其条件是采用Protein A色谱柱，以流动相A和流动相B进行梯度洗脱，流速为0.5-1.0mL/min，柱温20-30℃，检测波长为280nm；
所述的流动相A,为磷酸盐和氯化钠混合的水溶液，pH为7.0-7.5；
所述的流动相B,为柠檬酸和氯化钠混合的水溶液，pH为3.4-3.8；
所述的以流动相A和流动相B进行梯度洗脱，首先用流动相A进行3-5min平洗，再用流动相B进行10-15min洗脱；最后用流动相A进行3-5min洗脱。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述的磷酸盐为二水磷酸二氢钠或十二水磷酸氢二钠中的一种或两种。
4.根据权利要求2或3所述的检测方法，其特征在于，所述磷酸盐的浓度为10-50mM。
5.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述的柠檬酸的浓度为10-50mM。
6.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述的氯化钠的浓度为0.05-0.3M。
7.根据权利要求2或3所述的检测方法，其特征在于，所述磷酸盐的浓度为18-22mM。
8.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述的柠檬酸的浓度为18-22mM。
9.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述的氯化钠的浓度为0.12-0.18M。
10.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述的Protein A色谱柱，为Mabselect SuRe 1ml预装柱。
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