[发明专利]梅毒螺旋体IgG抗体生物素亲和素酶联免疫检测试剂盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及梅毒的检测，尤其是涉及梅毒螺旋体IgG抗体生物素亲和素酶联免疫检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

梅毒是梅毒螺旋体引起的性传播性疾病，近年来在国内的发病率居高不下，梅毒的防控已成为我国公共卫生服务的主要任务之一。

梅毒的实验室诊断方法主要有如下几种([1]林丽蓉,杨波,潘锡涛,等.潜在的血源传播患者梅毒血清学检测方法的选择.中华医院感染学杂志.2010，20(10)：1491-1494)：

(1)病原学检测：梅毒螺旋体感染早期，当梅毒抗体还未产生或含量较低时，暗视野显微镜查找螺旋体成为最早的实验室诊断方法，但易受取材技术、取材部位、样本中梅毒螺旋体含量、局部用药及送检时间等诸多因素影响，灵敏度较低。

(2)抗体检测试验：梅毒螺旋体不能进行体外培养，诊断主要依赖于实验室检查，现有的血清学检测灵敏度、特异性不高，任何一种检测方法均存在缺陷，临床漏诊和误诊率较高。

用于梅毒血清学检验的抗原主要以重组抗原TPN15、TPN17、TPN37、TPN44.5、TPN47为主([2]Lin,L.R.,Z.G.Fu,et al.Development of a colloidal gold-immunochromatography assay to detect immunoglobulin G antibodies to Treponema pallidum with TPN17and TPN47.Diagnostic microbiology and infectious disease.2010.68(3):193-200.)，这些抗原大多来源于梅毒螺旋体外膜，但不能区分是否为致病性螺旋体所致。

发明内容

本发明的目的是提供一种梅毒螺旋体IgG抗体生物素亲和素酶联免疫检测试剂盒及其制备方法。

所述梅毒螺旋体IgG抗体生物素亲和素酶联免疫检测试剂盒，设有：

外包装盒、浓缩洗涤液瓶、阴性对照品瓶、阳性对照品瓶、生物素标记抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体瓶、辣根过氧化物酶标记亲和素瓶、TMB显色液A瓶、显色液B瓶、反应终止液瓶、包被有重组抗原微孔板；

浓缩洗涤液瓶、阴性对照品瓶、阳性对照品瓶、生物素标记抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体瓶、辣根过氧化物酶标记亲和素瓶、TMB显色液A瓶、显色液B瓶、反应终止液瓶和包被有重组抗原微孔板装在外包装盒内；

浓缩洗涤液瓶内装有浓缩洗涤液，阴性对照品瓶内装有阴性对照品，阳性对照品瓶内装有阳性对照品，生物素标记抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体瓶内装有生物素标记抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体，辣根过氧化物酶标记亲和素瓶内装有辣根过氧化物酶标记亲和素，TMB显色液A瓶内装有TMB显色液A，显色液B瓶内装有显色液B，反应终止液瓶内装有反应终止液；

所述TMB显色液A为3,3',5,5'-四甲基联苯胺(3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine，TMB)显色液；

所述显色液B为3％的过氧化氢溶液。

所述浓缩洗涤液可采用溶有Tween-20的磷酸盐缓冲液，其中Tween-20的终浓度为0.05％，使用时用蒸馏水进行20倍稀释。

所述阴性对照品为梅毒螺旋体总抗体阴性对照品，由非梅毒感染的健康人群血清配制而成，使用本试剂盒进行检测其OD450nm吸光值小于0.1；所述OD450nm为主波长，450nm是测定的样本显色吸光值。

所述阳性对照品为梅毒螺旋体总抗体阳性对照品，由梅毒患者的阳性血清配制而成，用本试剂盒进行检测其OD450nm吸光值大于0.5；所述OD450nm为主波长，450nm是测定的样本显色吸光值。

所述TMB显色液A为3,3',5,5'-四甲基联苯胺(3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine，TMB)显色液，商品名叫TMB显色液A，市售品可购自厦门波生生物科技有限公司。

所述显色液B为3％的过氧化氢溶液，商品名叫显色液B，市售品可购自厦门波生生物科技有限公司。

所述反应终止液可采用摩尔浓度2mmol/L的硫酸。

所述瓶可采用聚乙烯瓶。

所述梅毒螺旋体IgG抗体生物素亲和素酶联免疫检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：