[发明专利]一种提高胭脂萝卜胚胎发生率的方法

权利要求书

1.一种提高胭脂萝卜胚胎发生率的方法，包括以下步骤： 

1)取胭脂萝卜和青花菜的花蕾，灭菌； 

2)将混合花蕾灭菌后的胭脂萝卜游离小孢子与青花菜花药置于培养液中，经热击后混合培养，诱导获得子叶型胚状体； 

3)将子叶型胚状体接种至固体分化培养基中，培养得到再生植株； 

4)从再生植株切取再生芽，接入生根培养基，获得完整植株。 

2.根据权利要求1所述一种提高胭脂萝卜胚胎发生率的方法，其特征在于，所述胭脂萝卜小孢子出胚率差，青花菜易出胚。 

3.根据权利要求1或2所述一种提高胭脂萝卜胚胎发生率的方法，其特征在于，所述胭脂萝卜和青花菜的花蕾均处于单核晚期至双核早期。 

4.根据权利要求3所述一种提高胭脂萝卜胚胎发生率的方法，其特征在于，所述胭脂萝卜花蕾与青花菜花药的数量比为1：5～8。 

5.根据权利要求1或2或4所述一种提高胭脂萝卜胚胎发生率的方法，其特征在于，胭脂萝卜小孢子与青花菜花药混合液采用32～33℃热击处理1～3天。 

6.根据权利要求1或2所述一种提高胭脂萝卜胚胎发生率的方法，其特征在于，步骤2)中所述培养液为NLN-13液体培养基和无菌活性炭混合液的混合物，其中活性炭混合液的组成为：1L NLN液体培养基、2～5g琼脂糖和1g活性炭。 

7.根据权利要求5所述一种提高胭脂萝卜胚胎发生率的方法，其特征在于，所述小孢子悬浮液与花药混合热击后，先在25℃、黑暗条件下恒温培养10～15天至肉眼可见细胞团出现后，移到25℃、黑暗条件下50～60rpm振荡培养10～15天，得到子叶型胚状体。 

8.根据权利要求1或2或4或6所述一种提高胭脂萝卜胚胎发生率的方法，其特征在于，步骤3)中所述固体分化培养基为B5培养基+蔗糖30g/L，琼脂10～12g/L，pH 5.9～6.1。 

9.根据权利要求8所述一种提高胭脂萝卜胚胎发生率的方法，其特征在于，所述生根培养基由1/2MS培养基1L+0.1～0.2mg/L NAA+0.1～0.2mg/L IBA、蔗糖或白砂糖20～30g/L和琼脂7～8g/L组成，pH 5.8～6.0。