[发明专利]抗PD-1抗体及其应用

说明书

本发明提供了一种新的PD‑1抗体或其功能性片段。特别地，本发明还涉及所述抗体在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途。

技术领域

本发明提供了一种新的PD-1抗体或其功能性片段。特别地，本发明还涉及所述抗体在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途。

背景技术

T细胞共受体信号是紧密调节免疫反应的重要机制。共信号的细胞表面分子(包括共刺激和共抑制)可分成两类主要的家族：免疫球蛋白(Ig)超家族与肿瘤坏死因子(TNF)-肿瘤坏死因子受体(TNFR)超家族。通常T细胞的激活依赖于HLA-I类或II类分子呈递抗原肽。共受体信号则增加或防止这种激活。例如利用激动剂活化CD28或4-1BB，通过独特的共刺激途径，可以提高周围淋巴器官中淋巴细胞的启动和成熟，或增强其在机体的应答效应。免疫激活也可以通过利用拮抗体阻断共抑制信号通路实现，如程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)、B7同系物1(B7-H1，也称为PDL1)通路、细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA4)、B/T淋巴细胞衰减子(BTLA)等通路。这些共抑制信号通路在调控免疫耐受中发挥重要作用，提供了限制、终止和/或减弱免疫反应的负信号。共刺激受体介导的免疫激活是通过刺激近膜激酶活化并产生磷酸化级联放大，而共抑制受体如CTLA4，PD1和B/T淋巴细胞衰减因子(BTLA)则招募磷酸酶扭转免疫活化诱导的磷酸化反应。免疫调节生物制剂可广泛地用于治疗免疫相关疾病，抑制诸如移植排斥、自身免疫疾病或炎症性疾病等引起的免疫亢进，或刺激癌症、慢性细菌、病毒感染等免疫机能减退的免疫应答。不同于主流的单克隆抗体和重组融合蛋白为基础的疗法-既通过中和或消耗靶抗原或靶标阳性细胞，免疫调节生物制剂主要通过结合并调控宿主免疫细胞表面的信号分子，来调节抗原特异性T细胞受体(TCR)和B细胞受体(BCR)的信号，从而控制淋巴细胞应答的方向和强度。

PD-1基因在T细胞杂交瘤凋亡时发生上调，被命名为程序细胞死亡蛋白1。PD-1(CD279)表达于活化的T细胞、B细胞，以及活化的骨髓细胞(Ishida Y，Agata Y，ShibaharaK，Honjo T.EMBO J.1992，1：3887-3895)，也表达在活化的巨噬细胞、DC和单核细胞，但不存在于他们的幼稚细胞(AgataY，et al.Int.Immunol.1996，8：765-772；Said EA，etal.Nature Med.2010，16：452-459)。这些细胞表面PD-1的表达上调可抑制机体获得性免疫和先天免疫反应。PD-1胞内结构域包含两个酪氨酸位点，一个为免疫受体酪氨酸抑制性受体(ITIM)，另一个为免疫受体酪氨酸的开关结构单元(ITSM)。ITSM上酪氨酸的磷酸化招募酪氨酸磷酸酶SHP2和/或SHP1。这些磷酸酶可对ZAP70、CD3和PKC去磷酸化，从而削弱T细胞的信号。PD-1主要通过G0/G1期阻滞抑制T细胞和B细胞增殖细胞，并抑制T细胞产生细胞因子。PD-1表达缺失的动物产生各种自身免疫表型，包括自身免疫性心肌病和狼疮样综合征关节炎和肾炎(Nishimura et al.Immunity.1999，H：141-51；Nishimura etal.Science.2001，291：319-22)。此外，PD-1也在自身免疫性脑脊髓炎、全身性红斑狼疮、移植物抗宿主病(GVHD)、I型糖尿病和类风湿性关节炎等中发挥作用(Salama et al.J ExpMed.2003，198：71-78；Prokunina and Alarcon-Riquelme，Hum MoI Genet.1992，13：R143；Nielsen et al.Lupus.2004，11：510)。