[发明专利]一种电动剥卵装置及其剥卵方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种生殖实验室设备，具体涉及一种电动剥卵装置及其剥卵方法，属于实验室显微操作技术领域。

背景技术

剥卵是生殖实验室日常工作重要内容，包括：剥除经酶预消化的卵冠丘复合体的颗粒细胞，以便评估卵母细胞成熟度和便于显微操作，如单精子胞浆内注射(ICSI)、卵母细胞冷冻前需要剥除颗粒细胞；体外授精(IVF)，如微滴法IVF、试管法IVF后需要剥除卵母细胞外周的颗粒细胞，以便评估受精情况。剥卵在上述操作中占据重要地位，直接影响后续操作环节的效果。

数十年来，剥卵工具基本保持不变，完全通过手动方法操作。传统剥卵管包括剥卵针和剥卵巴氏管，分别套上相应的乳胶吸头组成剥卵针剥卵器和巴氏管剥卵器。传统剥卵方法是主要是通过手指反复按压乳胶吸头提供吸吹力量使经透明质酸酶预消化的卵冠丘复合体或行试管法IVF后被精子消化后的卵冠丘复合体进出剥卵管管口剥除颗粒细胞，或者使行微滴IVF后粘附在培养皿底的卵冠丘复合体中的卵母细胞在吸力的作用下脱离复合体，再经过反复吹吸剥去其余颗粒细胞。也有将剥卵管用软管连接口吸管组成口吸管式剥卵器，将吸嘴放入口腔中，通过口腔吹吸使冠丘复合体进出剥卵管管口剥除颗粒细胞。根据每个卵冠丘复合体颗粒细胞结合的紧密程度，剥去的难易程度不同，吸吹次数由数次至数十次不等。

专利“口腔球囊式剥卵器”(专利号：CN200720157432.9)是一种对卵母细胞周围的卵冠丘复合物进行剥离的口腔球囊式剥卵器。它包括微吸管，在微吸管的后端套接有软管，在软管的末端连接有软球囊。操作时，将球囊放入口腔上下牙齿之间，通过咬合牙齿来控制球囊提供吹吸力量，使卵母细胞反复地轻柔地进出微吸管尖端，达到剥除卵母细胞周围大部分颗粒细胞的目的。该发明将口吸管的吸嘴换成球囊，通过牙齿咬合挤压球囊达到吸吹的效果。该方法和口吸管方式相比，可以避免口腔呼气污染卵母细胞的风险。

专利“剥卵针”(专利号：CN201220219074.0)提供一种适合所有大小卵母细胞的剥卵针。该发明用于剥离卵母细胞周围颗粒细胞的围颗粒细胞的中空剥卵针。该发明只针对剥卵针的结构进行了改变，剥卵方式和传统方法相同。

专利“一种新型试管婴儿剥卵操作器”(专利号：CN201320050412.7)提供的剥卵操作器由手持按压装置和吸取卵母细胞装置构成，手持按压装置由压杆帽、笔帽、后壳、弹簧、压杆和前壳构成，吸取卵母细胞装置由气囊、PS管、针座和剥卵管构成，气囊、PS管、针座和剥卵管从上至下依次装在后壳的中下部；前壳的中部装有与滑扣连接的推钮。该发明在操纵性上比传统的乳胶吸头有了明显提高。

然而，现有技术的剥卵设备存在以下不足。

第一，控制不精确，存在多种风险。现有剥卵技术中，由操作者的肌肉力量控制剥卵器弹性操作元件的乳胶吸头、口吸管、口腔球囊、气囊。乳胶吸头、口腔球囊和气囊在受到外力作用发生压缩变化时，其材质所拥有的弹性具有解除压缩形变恢复原状的能力，是此类手动剥卵器的产生吸力的动力来源。操作者施加于上述弹性操作元件原件的挤压力是此类手动剥卵器产生吹力的动力来源。在口吸管剥卵器中,口腔的作用类似于上述剥卵器的弹性操作元件，不同点在于，吹和吸都是操作者主动施力的过程。在吸力和吹力发生和转换过程始终伴随按压力与弹性元件复原力之间的对抗性平衡。在剥卵时，尤其是剥卵开始阶段，卵冠丘复合体比剥卵管管口内径稍大，通过剥卵管管口时会发生堵的现象，表现为卵冠丘复合体通过剥卵管管口速度减慢。操作者在调整增加吸力或者吹力，尤其是增加吹力后，一旦卵冠丘复合体通过剥卵管管口，操作者无法及时制动，相接的吸和吹两个过程失衡，发生的体积变化不一致，吹产生的体积变化大于吸产生的体积变化，导致吹出一连串气泡。卵冠丘复合体或卵母细胞被气泡吸附于其边缘，随气泡漂浮在培养基液滴表面。剥卵操作界面与气泡存在于不同的焦距面，被气泡吸附的卵冠丘复合体或卵母细胞也可以位于气泡表面的任何位置，在气泡边缘寻找卵冠丘复合体或卵母细胞需要不断的调整显微镜焦距，致使整个剥卵操作时间延长，不仅增加因体外操作时间延长损伤卵母细胞的风险，还存在导致丢失卵母细胞的重大风险。操作者为了尽可能的避免气泡产生，一般事先用剥卵管吸取几微升培养基滞留在剥卵管尖端，用于吹吸体积不一致时的补偿，使得剥卵管内液柱长度远远超出培养皿内液体高度。