[发明专利]基于桥式双环糊精主客体诱导聚集构筑的聚集体及其应用

权利要求书

1.一种基于桥式双环糊精主客体诱导聚集构筑的聚集体，其特征在于：构筑单元以胱氨酸桥式双β-环糊精为主体（LCD），以金刚烷聚乙烯亚胺为客体（PEI-Ada），通过主客体诱导聚集构筑的二元超分子聚集体并可有效的凝聚质粒DNA，其中胱氨酸桥式双β-环糊精的化学分子式为C₄₈H₈₄N₂O₂₂S₂，金刚烷聚乙烯亚胺平均一条高分子链上修饰13.7个金刚烷单元，该聚集体构筑单元的结构如下：

。

2.根据权利要求1所述基于桥式双环糊精主客体诱导聚集构筑的聚集体，其特征在于：所述聚集体与质粒DNA氮/磷比为20时，所形成纳米粒子的粒径大小为83 nm，表面电势为27.2 mV，能够有效地通过静电相互作用与带负电的质粒DNA形成复合物。

3.一种如权利要求1所述基于桥式双环糊精主客体诱导聚集构筑的聚集体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）在氮气氛围下，将金刚烷乙酸溶于无水乙醇中得到金刚烷乙酸-乙醇溶液，然后将溶有1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺的乙醇溶液加入到上述金刚烷乙酸-乙醇溶液中，搅拌反应30 min，得到反应液；

2）将分子量为10000的聚乙烯亚胺溶于无水乙醇中，加入到上述反应液中，在25℃条件下搅拌24小时，然后装入截留范围为8000-14000的透析袋中连续透析5天，将所得透析液冻干后即可制得金刚烷聚乙烯亚胺（PEI-Ada）；

3）将上述金刚烷聚乙烯亚胺溶于水中，然后加入胱氨酸桥式双β-环糊精并混合均匀，即可制得基于主客体诱导聚集构筑的聚集体。

4.根据权利要求3所述基于桥式双环糊精主客体诱导聚集构筑的聚集体的制备方法，其特征在于：所述金刚烷乙酸-乙醇溶液中金刚烷乙酸与乙醇的用量比为0.058 mol/L；在1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐-N-羟基琥珀酰亚胺-乙醇溶液中，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺与乙醇的用量比均为0.151 mol/L；反应液中金刚烷乙酸、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为0.58 ：0.754 ：0.754。

5.根据权利要求3所述基于桥式双环糊精主客体诱导聚集构筑的聚集体的制备方法，其特征在于：所述聚乙烯亚胺和乙醇的用量比0.001 mol/L，金刚烷乙酸与聚乙烯亚胺的摩尔比为0.58 ：0.01。

6.根据权利要求3所述基于桥式双环糊精主客体诱导聚集构筑的聚集体的制备方法，其特征在于：所述金刚烷修饰聚乙烯亚胺与水的用量比为0.397 mmol/L，金刚烷修饰聚乙烯亚胺与胱氨酸桥式双β-环糊精的摩尔比为0.397 ：0.121。

7.一种如权利要求1所述基于桥式双环糊精主客体诱导聚集构筑的聚集体的应用，其特征在于用于负载质粒DNA作为基因运输的载体并将绿色荧光蛋白质粒DNA转染进入293T细胞，负载质粒DNA的聚合物溶液的制备方法如下：

将制得的聚集体和质粒DNA分别溶于水中得到浓度为0.397 mmol/L的聚集体溶液和浓度为0.1mg/μL的质粒DNA溶液，将20μL聚集体溶液与20μL质粒DNA溶液混合，混合液中的氮/磷比为20，振荡5秒钟后，室温下静置30 min，即可制得负载了质粒DNA 的聚合物溶液。