[发明专利]一种人胞质凝溶胶蛋白的表达纯化方法在审
| 申请号： | 201410268959.3 | 申请日： | 2014-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN104004780A | 公开（公告）日： | 2014-08-27 |
| 发明（设计）人： | 吉丽娜;华子春;赵熙 | 申请（专利权）人： | 南京大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C07K14/47;C07K1/22 |
| 代理公司： | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人： | 徐蓓 |
| 地址： | 210093 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 人胞质凝 溶胶 蛋白 表达 纯化 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种人胞质凝溶胶蛋白的表达纯化方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
（1）构建含有人胞质凝溶胶蛋白基因（hcGSN）的重组表达载体pET-15b-hcGSN；
（2）将重组表达载体pET-15b-hcGSN转化于大肠杆菌BL21(DE3)，得到含有重组质粒的工程菌株；
（3）将工程菌接种于LB液体培养基中培养，加入终浓度为0.4mM的IPTG，于37℃诱导表达4小时；
（4）5000rpm离心收集菌体并于冰浴中超声波裂解，然后15000rpm离心获取上清；
（5）将上清上样于镍离子亲和层析柱Ni Sepharose 6 Fast Flow，纯化得到N端带有His标签的重组蛋白hcGSN。
2.根据权利要求1所述的人胞质凝溶胶蛋白的表达纯化方法，其特征在于：所述的His标签与hcGSN的氨基酸序列之间还设计有凝血酶的切割位点，即Leu-Val-Pro-Arg-Gly-Ser。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京大学，未经南京大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201410268959.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种带加筋肋菱形布置低桩承台
- 下一篇：基础桩与承重平台之间的连接件
