[发明专利]一种匀浆法协同酶解制备薯蓣皂苷元的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物有效成分分离领域，具体涉及一种利用匀浆法协同酶解提取薯蓣皂苷元的方法。

背景技术

穿山龙为薯蓣科植物穿山龙薯蓣的干燥根茎，所含的主要成分为薯蓣皂苷。我国薯蓣属植物资源丰富，有60多种，大多数含有多量薯蓣皂苷。薯蓣皂苷经酸或酶水解后，生成薯蓣皂苷元（俗称薯蓣皂苷素）和1分子葡萄糖及2分子鼠李糖。薯蓣皂苷元为白色晶体，熔点204~207℃，可溶于常用的有机溶剂如乙醚、石油醚、汽油及醋酸中，不溶于水，是目前合成各种甾体药物的重要合成原料。

目前关于薯蓣皂苷元的制备方法的专利和文献较多，包括使用酸水解法、有机溶剂（如石油醚、汽油、己烷、氯仿等）法，超临界流体萃取法，或超声提取酸水解法等。然而，传统的方法需经过多次的萃取浓缩，能耗高，生产周期长，提取率低，同时也对环境造成了严重的污染；而超临界流体萃取法和超声波提取法效果虽好，但存在设备一次性投入过高的缺点。如专利200410060679.X公布了的方法，其不足之处是仍使用传统的盐酸为催化剂，产生大量的酸性有机废水，无法从根本上解决薯蓣皂苷元生产的污染问题，且得率较低。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种工艺简单、提取时间短、收率高的制备薯蓣皂苷元的方法。

本发明包括以下步骤：

将穿山龙除杂切片晒干，烘干粉碎，过100目筛，加入原料5~8倍（重量比）的50~70%的乙醇，使用高速匀浆机，在200W的功率下，对穿山龙粉末进行处理8~10min，得薯蓣皂苷提取液，再加入原料3~4%（重量比）的复合酶，醋酸/醋酸钠调节PH为3.5~4.5，搅拌均匀，于50~60℃酶解1~2h，80℃灭活15min，氢氧化钠调PH为中性，经离心、浓缩、重结晶得薯蓣皂苷元。本发明所述的生物酶为纤维素酶、半纤维素酶与淀粉酶的复合酶（比例为0.4:0.2:0.4），结晶溶剂为石油醚、甲醇或乙醇。

本发明使用匀浆法提取植物的有效成分，通过机械及液力剪切作用将物料撕裂和粉碎，使物料破碎和有效成分的提取同步进行，达到对植物有效成分快速、强化提取的目的。再结合复合酶（纤维素酶、半纤维素酶和淀粉酶酶）进一步的破坏细胞的细胞壁和细胞质，使其疏松、膨胀、崩溃，从而增大了有效成分的扩散面积，减小了阻力，提高了有效成分的得率。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

将穿山龙除杂切片晒干，烘干粉碎，过100目筛，取100g，加入原料5倍（重量比）的50%的乙醇，使用高速匀浆机，在200W的功率下，对穿山龙粉末进行处理8min，得薯蓣皂苷提取液，再加入原料3%（重量比）的复合酶（纤维素酶、半纤维素酶和淀粉酶比例为0.4:0.2:0.4），醋酸/醋酸钠调节PH为3.5，搅拌均匀，于50℃酶解2h，80℃灭活15min，氢氧化钠调PH为中性，经离心、浓缩、石油醚重结晶得薯蓣皂苷元1.92g，经检测，薯蓣皂苷元的收率为1.92%。

实施例2：

将穿山龙除杂切片晒干，烘干粉碎，过100目筛，取100g，加入原料7倍（重量比）的70%的乙醇，使用高速匀浆机，在200W的功率下，对穿山龙粉末进行处理10min，得薯蓣皂苷提取液，再加入原料4%（重量比）的复合酶（纤维素酶、半纤维素酶和淀粉酶比例为0.4:0.2:0.4），醋酸/醋酸钠调节PH为4.5，搅拌均匀，于55℃酶解1.5h，80℃灭活15min，氢氧化钠调PH为中性，经离心、浓缩、乙醇重结晶得薯蓣皂苷元2.05g，经检测，薯蓣皂苷元的收率为2.05%。

实施例3：

将穿山龙除杂切片晒干，烘干粉碎，过100目筛，取100g，加入原料8倍（重量比）的65%的乙醇，使用高速匀浆机，在200W的功率下，对穿山龙粉末进行处理9min，得薯蓣皂苷提取液，再加入原料3.5%（重量比）的复合酶（纤维素酶、半纤维素酶和淀粉酶比例为0.4:0.2:0.4），醋酸/醋酸钠调节PH为4.0，搅拌均匀，于60℃酶解1h，80℃灭活15min，氢氧化钠调PH为中性，经离心、浓缩、甲醇重结晶得薯蓣皂苷元1.97 g，经检测，薯蓣皂苷元的收率为1.97%。