[发明专利]一种具有抗菌活性的葎草有效部位及其应用

说明书

技术领域

本发明属于中药制剂领域，具体涉及一种葎草的有效部位黄酮类化合物，以及该有效部位的抗菌活性及其在制备抗菌药物中的用途。

背景技术

近年来，由于抗生素的滥用和细菌的进化，临床上细菌感染耐药问题愈发严重，作为抗生素生产和使用大国，耐药感染性疾病已成为我国临床感染性疾病死亡的主要因素。因此，研制低毒、有效的耐药性抑制剂具有广泛的应用价值和良好前景。研究发现某些中草药具有广谱抗菌作用、且可提高机体免疫力，所以由抗生素应用引起的耐药性问题使国内外医药研发人员把注意力转向具有抗菌活性的中草药，中草药抗菌活性成分与抗生素联合用药将大大降低病菌的耐药性。为进一步充分发挥我国中草药资源优势，寻找具有抗耐药菌活性的中药有效部位或成分解决耐药菌感染问题无疑将是一条行之有效的途径。

葎草Humulus scandens(Lour.)Merr.为桑科(Moraceae)葎草属(Humulus)植物葎草的干燥全草，为一年或多年生草本，除青海、新疆以外，全国各地均有分布，另外东北亚、北美洲也有分布。别名剌刺秧、降龙草、簕草、五爪龙、割人藤等，葎草味甘苦，性寒，归肾、肺经，具有清热解毒、利尿通淋的功效，始载于《唐本草》；内服用于肺结核潮热、感冒发热、痢疾、肠胃炎、肾盂肾炎、急性肾炎、膀胱炎、泌尿系结石等病症；外用可治痈疽肿毒、湿疹、毒蛇咬伤等。该植物主要含有黄酮类、萜类、挥发油类、甾体类等化合物。纵观国内外报道，对葎草提取物及药理活性的研究，多集中在葎草提取物对抗炎镇痛、抗结核、抗氧化等方面的报道，目前鲜有对葎草有效部位抑制细菌生长的研究，尤其是没有针对临床耐药菌抗菌活性的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种葎草有效部位及其制备方法，该部位主要为具有一定含量的黄酮类化合物及其成分组成。

本发明的另一个目的在于提供葎草有效部位的抗菌活性，尤其是对临床耐药菌的抗菌活性。

本发明的进一步的目的在于提供葎草有效部位的制剂及其在治疗细菌感染性引起的腹泻、肠胃炎及肾盂肾炎、急性肾炎、膀胱炎等泌尿系统疾病的药物联合用药方面的应用和制备助消化、预防和保健食品方面的应用。

本发明的目的是通过以下途径实现的：

本发明提出的葎草有效部位系从葎草干燥全草中提取富集纯化得到的，其制备工艺过程为：

(1)提取：取葎草全草，采用水或5％-100％的醇(甲醇、乙醇、正丁醇中的的任意一种或几种的混合物)提取，过滤，得提取液。

(2)初步处理：取步骤(1)中制得的提取液，减压回收浓缩，加入适当乙醇使乙醇浓度达到50％-90％，静置沉淀，过滤得滤液，减压回收至滤液无醇味，得滤液A备用，或者取步骤(1)中制得的提取液，用石油醚萃取除去脂溶性成分，得滤液B备用。

(3)粗制和精制：取步骤(2)中的滤液A或滤液B通过大孔树脂吸附洗脱，洗脱剂采用水、10％-95％醇(乙醇或甲醇)进行梯度洗脱，分段收集10％-95％醇洗脱物，浓缩后得粗制物，取粗制物通过聚酰胺树脂吸附洗脱，洗脱液采用水、20％-95％醇(乙醇或甲醇)进行梯度洗脱，分段收集20％-95％醇洗脱物，浓缩干燥后得葎草有效部位；或者取步骤(2)中的滤液A或滤液B进行硅胶柱层析，洗脱剂采用体积比为50∶1-40∶1的氯仿-甲醇混合液、20∶1-5∶1的氯仿-甲醇混合液进行梯度洗脱，收集体积比为20∶1-5∶1的氯仿-甲醇洗脱液，浓缩干燥后得葎草有效部位。

本发明提出的葎草有效部位主要为黄酮类化学成分，其组成主要包括芹菜素、木犀草素、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、大波斯菊苷、牡荆素、蒙花苷及N-p-香豆酰酪胺等；上述葎草有效部位中黄酮类成分百分含量为20％-90％。

本发明提出的葎草有效部位具有显著地抗菌活性，体外抗菌试验证实其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌(含耐药金黄色葡萄球菌)、表皮葡萄球菌(含耐药表皮葡萄球菌)、肺炎克雷伯杆菌、大肠屎球菌、大肠粪球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌等均具有较明显的抑菌活性，尤其对临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林表皮葡萄球菌、大肠屎球菌、大肠粪球菌显示了较强的抑菌活性。

本发明提出的葎草有效部位可作为药物原料，进一步制成抗菌药物片剂、胶囊等，尤其是制备成治疗细菌感染性引起的腹泻、肠胃炎及肾盂肾炎、急性肾炎、膀胱炎等泌尿系统疾病的药物和具有助消化、预防和保健功能的食品。