[发明专利]用于特异性谷类过敏原IgE筛查的试纸条及其制备方法

权利要求书

1.一种用于特异性谷类过敏原IgE筛查的试纸条，其特征在于，所述试纸条包被有胶体金标记的谷类抗原。

2.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述试纸条为包被有胶体金标记的谷类抗原的硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜。

3.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述试纸条的pH值为8.5-10，胶体金颗粒与谷类抗原之间的摩尔比为10-20:1。

4.根据权利要求1-3任一项所述的试纸条，其特征在于，谷类的来源包括但不限于小麦、大麦、玉米、荞麦、大米、小米、高粱米、薏米。

5.根据权利要求4所述的试纸条，其特征在于，所述谷类抗原为小麦抗原；所述小麦抗原的制备方法为：取生小麦200g，用粉碎机进行粉碎，用300mL苯的分析纯溶液脱脂5-6次，离心后所得沉淀物置于通风橱中，将残余的苯挥发完全，所得物质即为小麦抗原。

6.权利要求1-5任一项所述试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)谷类抗原溶液的制备：将待标记的谷类抗原溶解在0.9％pH7.0的NaCl溶液中，使其终浓度为50-500μg/ml，即得谷类抗原溶液；

2)胶体金溶液的制备：用0.1M K₂CO₃溶液和0.1M HCl调0.01％HAuCl₄胶体金溶液的pH值至8.5-10，使胶体金的粒径达到40-60nm，浓度达到0.5-2％，即得胶体金溶液；

3)胶体金与谷类抗原的结合：用0.1M K₂CO₃溶液调步骤1)的抗原溶液的pH值至8.5-10，边搅拌边向其中加入步骤2)的胶体金溶液，抗原溶液与胶体金溶液的体积比为1-10:100，同时加入稳定剂以防止谷类抗原与胶体金颗粒聚合沉淀，即得胶体金-谷类抗原结合物；所述稳定剂为BSA和分子量20KD的聚乙二醇，二者终浓度分别为1％和0.1％；

4)胶体金标记的谷类抗原的纯化：将步骤3)中制备的胶体金-谷类抗原结合物经1500r/min离心20min；收集沉淀溶于稳定剂中，使其浓度达到5-30％；然后加至Sephacryl S-400层析柱上进行纯化，将纯化的胶体金标记的蛋清抗原溶液过滤除菌，4℃保存；所述稳定剂为1％BSA和0.1％分子量20KD的聚乙二醇溶液；

5)试纸条的包被：将步骤4)中制备的胶体金标记的谷类抗原溶液喷线于试纸条上，干燥后即得用于特异性谷类抗原过敏原IgE筛查的试纸条成品。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤4)中加样量为Sephacryl S-400层析柱体积的1/10，以稳定剂作为洗脱液，流速为5-10ml/h；所述稳定剂为1％BSA和0.1％分子量20KD的聚乙二醇溶液。