[发明专利]一种比率荧光纳米探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种比率荧光纳米探针，其特征在于，包括包埋有联吡啶钌的二氧化硅荧光纳米粒子，和通过共价键与二氧化硅荧光纳米粒子连接的水溶性锌离子识别探针。

2.根据权利要求1所述的比率荧光纳米探针，其特征在于，所述的水溶性锌离子识别探针是由氨基喹啉类衍生物与树枝状聚乙烯亚胺接枝形成。

3.根据权利要求2所述的比率荧光纳米探针，其特征在于，氨基喹啉类衍生物为8-氯乙酰基氨基喹啉。

4.一种根据权利要求1所述的比率荧光纳米探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1. 水溶性锌离子识别探针的合成：将氨基喹啉类衍生物、树枝状聚乙烯亚胺与无水碳酸钾混合，搅拌，进行接枝反应，加热在惰性气体保护下进行回流回收；

S2. 包埋联吡啶钌的二氧化硅荧光纳米粒子的制备；

S3. 比率荧光纳米探针的制备；将步骤S1所得的水溶性锌离子识别探针和步骤S2所得的二氧化硅荧光纳米粒子加入到磷酸缓冲液中，室温反应，即得。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，S2中所述的包埋联吡啶钌的二氧化硅荧光纳米粒子的制备采用油包水的反相微乳法制备。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，S3中所述的磷酸缓冲液含有N-羟基琥珀酰亚胺和(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐。

7.一种锌离子荧光检测方法，其特征在于，使用如权利要求1所述的比率荧光纳米探针。

8.根据权利要求7所述的锌离子荧光检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

SI. 体液中锌离子的检测：将比率荧光纳米探针加入到离心管中，加入不同浓度的锌离子，再用磷酸缓冲液定容，孵育，在365nm紫外灯下拍照，并用荧光分光光度计测定其在420-750 nm范围内的荧光光谱，激发波长为370 nm；

SII. 细胞内的锌离子成像:分别用共聚焦显微镜观察不用外源锌离子和用外源锌离子处理的细胞，记录绿色荧光通道和红色荧光通道荧光信号的改变和二者比值的变化考察荧光纳米探针对锌离子的响应。