[发明专利]心肌梗塞三联快速检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种心肌梗塞三联快速检测试剂盒，其特征在于试剂盒由心肌梗塞生物标志物人髓过氧化物酶(MPO)、心脏脂肪酸结合蛋白(FABP3)和其他任意一种心肌梗塞生物标志物组成。

2.根据权利要求1所述的心肌梗塞三联快速检测试剂盒，其特征在于试剂盒由人髓过氧化物酶(MPO)、心脏脂肪酸结合蛋白(FABP3)和高敏C反应蛋白(hsCRP)组成。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于试剂盒由人髓过氧化物酶(MPO)、心脏脂肪酸结合蛋白(FABP3)和肌钙蛋白(cTnI)组成。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于试剂盒由人髓过氧化物酶(MPO)、心脏脂肪酸结合蛋白(FABP3)和脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA₂)组成。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于试剂盒采用胶体金固相免疫层析法制备，试剂盒由试纸卡、比色卡和或胶体金定量读数仪构成。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于MPO、FABP3等三种检测抗体包被在同一张试纸条上或分别包被在三张试纸条上。

7.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于试纸卡结构为：在塑料底板一端粘贴上样垫，上样垫的一端紧密压接含有标记抗体的胶体金垫，胶体金垫一端紧密压接硝酸纤维素NC膜，NC膜上包被有相互分离的检测线T和质控线C，T线为和标记抗体配对的抗体，C线为羊抗鼠IgG抗体，NC膜的另一端连接吸样垫形成试纸，试纸装入塑料卡内形成试纸卡。

8.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于比色卡为白色背景上印有系列不同深浅红色线条，用于对检测结果的对比判断及定量判断，不同深浅红色线条分别对应相应标准品的浓度。

9.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于胶体金定量读数仪是一种光学检测系统，用于对检测结果的定量判定。

10.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于人髓过氧化物酶、心脏脂肪酸结合蛋白、高敏C反应蛋白的检测临界值分别为：3ng/ml、3ng/ml、1.0ug/ml。

11.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于试剂盒由人髓过氧化物酶、心脏脂肪酸结合蛋白、和肌钙蛋白的检测临界值分别为：3ng/ml、3ng/ml、0.1ng/ml。

12.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于试剂盒由人髓过氧化物酶、心脏脂肪酸结合蛋白、和脂蛋白相关磷脂酶A2的检测临界值分别为：3ng/ml、3ng/ml、175ng/ml。

13.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于试剂盒的制备方法如下：

1)准备好底板、样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜及吸水垫；

2)胶体金垫的制备：将标记有MPO、FABP3、CRP或cTnI或Lp-PLA2的胶体金喷涂于玻璃纤维素膜或无纺布上，烘干备用；

3)包被膜制备：将与1)中标记抗体配对的抗体稀释成适合的浓度，喷涂于硝酸纤维素NC膜，烘干备用；

4)试纸制备：在底板上依次相互交错地粘上制备的样品垫、胶体金垫、包被膜和吸水垫，按适合的尺寸切割成条，形成试纸条，试纸条装入塑料卡内，形成试纸卡。

14.根据权利要求13所述的制备方法，其特征在于胶体金垫制备过程为：以氯金酸-柠檬酸三钠还原法制备直径为15～50nm的胶体金溶液，制备完成后取100ml胶体金液放在烧杯内，用0.2M K₂CO₃调至pH8.0左右，分别加入三种0.5～2mg配对抗体至100ml胶体金溶液中，室温搅拌2小时，加入终浓度为1％牛血清白蛋白，1％聚乙二醇20000封闭20min，12000r/m离心30分钟，弃上清，用胶体金工作液复溶至50ml，按1ml溶液铺20cm²的比例均匀地铺在玻璃纤维膜或无纺布上，再置干燥间(温度20～25℃，湿度小于30％)干燥2～5小时，制成胶体金垫。